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200-375g冠状
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文献和实验保温30min。 (5)4%多聚甲醛PBS 5min。 (6)PBS冲洗2×min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10min。 (9)将切片用灭菌吸水纸吸干,然后入杂交液。核酸探针浓度为0.25~0.5μg./ml。每一正常成年大鼠脑冠状切片15μl杂交液足够。43℃保温12~16h。 (10)4×SSc 37℃冲洗30min。 (11)2×SSC(含RNasea 20
实验采用10只2-3周龄SD大鼠,雌雄均可,体重40~60 g。 1.2 试剂 纤连蛋白(fibronectin),Ⅳ型胶原,鼠尾胶,葡聚糖(dextran,分子量100~200kDa),DNA酶Ⅰ(DNaseⅠ)购自Sigma公司;D-Hanks液,PBS,10×PBS按配方自制;Ⅱ型胶原酶购自Worthington公司;明胶,牛血清白蛋白(BSA),HEPES购自Amresco公司;Percoll购自Amersham Biosciences;DMEM(高糖)购自Gibco BRL公司;肝素
EDTA 配),37℃保温30min。 (5)4%多聚甲醛PBs 5min。 (6)PBS冲洗2×min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10min。 (9)将切片用灭菌吸水纸吸干,然后入杂交液。核酸探针浓度为0.25~0.5μg./ml。每一正常成年大鼠脑冠状切片15μl杂交液足够。43℃保温12~16h。 (10
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