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2-8℃
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107/mL, 1 mL
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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时，如何进行流式凋亡分析？
、FITC、EGFP 等。 在这里，比较推荐的荧光组合是 Annexin-V APC/7AAD。APC 的激发/发射波长为 650/660，7AAD 的激发/发射波长为546/650，可以很好地降低 GFP 带来的干扰，使结果分析更加准确。 二、如何分析结果 在选择了合适的试剂盒进行上机检测后，恰当的结果分析，对于数据的完美呈现，也是至关重要的。以前文数据为例，我们来看看如何分析： 01 设置 FSC/SSC 圈门 根据大小及颗粒度，圈出需要分析的细胞群体，排除碎片及黏连体的影响； 02 调整荧光补偿
较暗的染料。为了保证每个通道的分辨率可接受，我们需要合理搭配抗原和染料。一般来说，较暗的染料，如FITC、PerCP等，优先分配给表达量高的抗原，而PE、APC、PerCP/Cy5.5、PE/Cy5等较亮的染料可以分配给表达量低或者分辨率要求比较高的抗原。合理配色的最终结果是让不同表达水平的抗原检测到的信号尽量均衡。 3) 保证搭配荧光染料的质检发射光谱重叠度尽量小 如前所述，当两种荧光染料的发射光谱重叠时，它们的荧光信号将会互相干扰，给数据分析带来麻烦。虽然荧光补偿技术
多色流式实验中，由于不同荧光素的发射波长的覆盖范围不同，可能产生重叠，对实验结果的数据分析造成一定干扰，我们通常会设置单阳管进行调节补偿。同时，单阳管还可以辅助我们调节通道电压，防止信号超出接收范围。 图示：常见荧光素的发射光谱 A. 如何设置单阳管 单阳管即单染管，是只添加一种荧光抗体的样本管。一般来说，实验 panel 有几种荧光，就需要设置几个单阳管。如：APC、PE、FITC 的三色 panel，需要设置三个单阳管。 B. 制备单阳管的要求 ①单阳管和全染管的样本类型、荧光素要保持
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