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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 库存：
21
- 生长状态：
悬浮生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
详见说明书
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 英文名：
小鼠杂交瘤细胞；PK136
- 规格：
株
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
以下是小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书详细说明：
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 杂交瘤细胞系PK136分泌一种小鼠单克隆抗体（IgG2a），此抗体与小鼠NK细胞起反应。 该细胞系由SP2/0-Ag14骨髓瘤和用CE小鼠脾细胞和骨髓细胞免疫的（C3H X BALB/C）F1小鼠的脾细胞融合而成。 此抗体对NK特异且在有补体时有细胞毒作用。 此抗体与不同小鼠株的细胞的反应方式，与常规的NK1.1抗血清的反应方式相符。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1：
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书培养操作步骤
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
人 TLR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 GSTA1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 IL9R 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 NT5E 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 IL18R1 / CD218a ELISA配对抗体
人 EphB1 / EPHT2 (aa 565-984) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CLEC2D / OCIL 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 CADM1 / IGSF4A 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书4-Amino-1-（β-D-ribofuranosyl）-1，3，5-triazin-2（1H）-one， Ladakamycin5-Azacytidine
Ac-LLM-CHO， N-Acetyl-Leu-Leu-MethionalCalpain Inhibitor II， ALLM
Glyceryl Triheptadecanoate （50 mg）1,1’,1’’-（1,2,3-propanetriyl） ester-heptadecanoic acid
4（Z），7（Z），10（Z）-Tridecatrienoic Acid-d5 （1 mg）（4Z，7Z，10Z）-trideca-4，7，10-trienoic-12，12’，13，13，13-d5 acid； 4（Z），7（Z），10（Z）-Tridecatrienoic Acid-d5
V-PYRRO/NO （10 mg）1-[（ethenyloxy）-NNO-azoxy]-pyrrolidine； V-PYRRO/NO
7，8-dihydro-L-Biopterin （10 mg）2-amino-6-（1R，2S-dihydroxypropyl）-7，8-dihydro-4（1H）-pteridinone； BH2|Dihydrobiopterin； 7，8-dihydro-L-Biopterin
Aminoguanidine （hydrochloride） （25 g）hydrazinecarboximidamide， monohydrochloride； Aminoguanidinium chloride|GER 11|Pimagedine； Aminoguanidine （hydrochloride）
IBMX （500 mg）3，9-dihydro-1-methyl-3-（2-methylpropyl）-1H-purine-2，6-dione； Isobutylmethylxanthine|1-Methyl-3-Isobutylxanthine|NSC 16596IBMX
[1aS-（1aα，8β，8aα，8bα）]-6-Amino-8-[[（aminocarbonyl）oxy]methyl]-1，1a，2，8，8a，8b-hexahydro-8a-methoxy-5-methylazirino[2’，3’:3，4]pyrrolo[1，2-a]indole-4，7-dione； AmetycineMitomycin C
DithiothreitolDTT
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文献和实验，无菌复溶 9. 淋巴细胞M密度梯度分离液（Accurate Chemical and Scientific），室温 10. RPMI-10完全培养基 11. FITC标记的抗CD3抗体和PE标记的PK136抗体（PharMingen） 12. 15ml和50ml带盖聚丙烯锥底离心管 13. Beckman CS-6R离心机（或同类离心机） 14. 血清学吸管 实验方法： 1. 处死小鼠，无菌取脾脏。 2. 制备脾脏
位点） VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物（引入NotⅠ酶切位点） VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA，反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
时代。近年来，抗体细胞工程技术已趋完善，并在小鼠-小鼠杂交瘤的基础上，又发展了小鼠-大鼠、小鼠-人以及人-人杂交瘤技术。制备McAb的小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术包括动物免疫、细胞培养、细胞融合、杂交瘤细胞系克隆和再克隆、抗体检测和扩增以及杂交瘤细胞株保存和复苏等技术步骤和操作流程。（一）动物免疫杂交瘤技术常用的瘤细胞来自于BALb/c小鼠，因此，一般选用6~10周龄，健康、发育良好的雌性BALb/c小鼠进行免疫。根据病原体的抗原性、免疫原性和小鼠免疫反应性决定免疫途径，免疫次数，间隔时间和持续
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