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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
32
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A
- 规格:
株
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A价格
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A价格实验要点及说明
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A价格冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1酸性糖蛋白2抗体(类粘蛋白2) 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗牛IgG 0.1ml
OS9 OS-9蛋白抗体 0.2ml
phospho-CK8 (Ser23) 磷酸化细胞角蛋白8抗体 0.1ml
Phospho-Lck (Tyr505) 磷酸化淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体 0.1ml
FAM78B FAM78B蛋白抗体 0.2ml
SPTLC2 丝氨酸棕榈酰转移酶2抗体 0.2ml
USF-1 等上游刺激因子1抗体 0.1ml
FLT-3/CD135 FMS样酪氨酸激酶3 0.2ml
TIM4 T淋巴细胞膜蛋白4抗体 0.1ml
DACH1 细胞命运决定因子DACH1抗体 0.2ml
小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A价格8,11-Eicosadiynoic Acid (5 mg)EDYA, 8,11-Eicosadiynoic Acid, 8,11-eicosadiynoic acid
Ac-AEVD-pNA, Caspase-10显色底物Caspase-10 Substrate AEVD-pNA
Z-LEHD-FMK, Caspase-9抑制剂(氟基)Caspase-9 Inhibitor Z-LEHD-FMK
Actinomycin C1, ActinomycinActinomycin D
Ac-VDVAD-AFC (1 mg)Caspase-2 Substrate (Fluorogenic)|N-Acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-7-amido-4-Trifluoromethylcoumarin; N-
Linoleoyl Ethanolamide (100 mg)N-(2-hydroxyethyl)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide
TMPD (hydrochloride) (5 g)N,N,N’,N’-tetramethyl-1,4-benzenediamine, dihydrochloride; Wurster’s Reagent|N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-Phenylenediamine; TMPD (hydrochloride)
GR Sample Buffer (10X) (1 ea)GR Sample Buffer (10X)
Estradiol EIA Antiserum (100 dtn)E2|β-Estradiol|17β-Estradiol|17β-Oestradiol; Estradiol EIA Antiserum
5(6)-TMR C6马来酰亚胺5(6)-TMR C6 maleimide
小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A价格培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验(1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5 ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
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