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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml
自备材料:
1、 TBST或Western洗涤液
2、 摇床
操作步骤(仅供参考):
蛋白印迹转膜后加入Western洗涤液,在摇床上摇动洗涤蛋白膜1~2min。
取恰当容量的容器加入Western封闭液(尼龙膜),在摇床上摇动室温封闭60min。
直接进行一抗孵育等后续操作。
注意事项:
如果对于一些背景非常高的抗体,可以4℃封闭过夜。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验样本准备 蛋白提取 所需仪器:匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF(蛋白酶抑制剂)、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子,消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液:PMSF=100:1。 1) 组织处理:首先用酒精棉消毒剪刀和镊子,取适量的组织于匀浆器中,用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。(含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆) 2) 细胞处理: A、 贴壁细胞处理:去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解
llh刘丽华 各位好:我做了1个多月western blot了,内参跑得还可以,但是目的蛋白总是跑不好,今天跑出来非特异性条带很清楚,而目的条带却很淡,不知是什么原因!前一次也是这种情况,我就延长封闭时间至2h,一抗1:700,二抗1:5000,请各位高手帮忙分析一下吧!下面是我的图片,最下面,模糊的一条(靠图片中间的一条)是我的目的条带! coffeeshine 如果非特异带很清楚,延长封闭时间没作用
xylish1 菜鸟一枚,目前要做HER-2(膜蛋白,185KD)western blot ,求教各位,一抗哪个公司的好?使用时抗体浓度,转膜时间及注意事项,多谢! zhe992000 搭车求助,我想验证肿瘤组织中透明质酸(hyaluronan)的表达水平,这是一个糖蛋白,主要在细胞外基质中表达。在文献上一般是通过透明质酸合成酶的水平 或者透明质酸水解酶的水平来间接判断透明质酸的表达水平,我想直接测定透明质酸的表达量,不知
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