高纯质粒小提试剂盒

特别提示：包括高纯质粒小提试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：高纯质粒小提试剂盒
英文名称：PlaPure Mini Extraction Kit

产品货号：高纯质粒小提试剂盒
产品规格：50次|200次

  本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA，经过两步洗涤，一步洗脱，最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。

试剂盒组成：

组份	50次	200次
Buffer P1	15ml	60ml
Buffer P2	15ml	60ml
Buffer N3	20ml	80ml
Buffer PB	10ml	35ml
Buffer PW(浓缩液)	6ml	25ml
Buffer EB	10ml	30ml
RNase A(10mg/ml)	150μl	600μl
吸附柱DM及收集管	50套	200套

自备试剂：无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，将吸附柱置于2～8℃可保存更长时间，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 、Buffer N3和 Buffer PB，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤：
1、取1-5ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中，13000rpm(~～16200×g)离心30秒收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮菌体沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，导致提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀4-6次，充分混匀使菌体裂解，此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。此步骤所用时间应不超过5分钟，避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350μl Buffer N3，立即温和地上下颠倒混匀8-10次，充分混匀，此时应出现白色絮状沉淀。13000rpm离心5分钟。
注意：Buffer N3加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
5、将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DM中，13000rpm离心30秒钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入150μl Buffer PB，13000rpm离心30秒。
7、向吸附柱中加入400μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
8、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入50-100μl Buffer EB，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时， Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)。


除了高纯质粒小提试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：


BTN130938 痰液采集器 1个
BTN80102 柱式粪便DNA提取试剂盒 50次
BTN80805 柱式毛发DNA提取试剂盒 50次
BTN130979 柱式血清血浆DNA提取试剂盒 50次
BTN51203 非酶RNA清除剂1.0 1.5mL
BTN111008 非酶多糖清除剂(DNA专用) 50次
WE0162 高纯质粒小提试剂盒 50次|200次
WE0173 植物基因组DNA提取试剂盒 50次|200次
WE0181 酵母基因组DNA提取试剂盒 50次
WE0183 游离DNA提取试剂盒 50次
ALH116 大量全血基因组DNA提取试剂盒(10ml) 16次×10ml|96次×10ml
ALH133 细菌基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附) 50次|100次|200次
ALH136 细菌基因组DNA提取试剂盒 50次|100次|200次
ALH148 新型植物DNA快速抽提试剂盒 50次|100次|200次
ALH152 酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附) 50次
ALH608 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI双染) 25次|50次
ALH161 M13噬菌体单链DNA提取试剂盒 50次|100次|200次
ALH088 柱式质粒大量提取试剂盒 10次
RFT031 PCR产物纯化试剂盒 100次|200次
SY0007 核糖核酸酶A(来源于牛胰腺) 100mg
QN0891 酵母基因组DNA提取试剂盒 50T|100T
QN0901 革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒 10T
CZ001 磁珠法血液DNA提取试剂盒 100次
CZ002 磁珠法唾液DNA提取试剂盒 100次
ML011 植物基因组DNA提取试剂盒（磁珠法） 200T
ML018 核酸（DNA/RNA）提取试剂盒(磁珠法) 64T
MT0046 组织细胞基因组DNA提取试剂盒 50T
GL1245 P:C:I(125:24:1,pH﹥7.8) 100ml