血液直接PCR扩增试剂盒

特别提示：包括血液直接PCR扩增试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：血液直接PCR扩增试剂盒
英文名称：Blood Direct PCR Kit

产品货号：血液直接PCR扩增试剂盒
产品规格：50μl×40次|50μl×200次

  本试剂盒是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，本产品使用简便，无需事先提纯可直接用血液为模板扩增目的基因，可有效扩增高GC含量的模板和引物。

试剂盒组成：

组份	50μl×40次	50μl×200次
2×Blood Direct PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：建议使用时添加≤10%的全血为模板，加上血液后用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	20μl反应体系
2×Blood Direct PCR Mix	25μl	10μl
Forward Primer，10μM	1μl	0.4μl
Reverse Primer，10μM	1μl	0.4μl
Template Blood	0.5-5μl	0.25-2μl
ddH2O	up to 50μl	up to 20μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	35-40个循环
退火	55-60℃	30 s
延伸	72℃	30-60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所含热启动酶的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

除了血液直接PCR扩增试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：


YT387 dGTP溶液(100mM) 250μl
YT390 dNTP混合溶液(2.5mM) 1ml
YT395 cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-) 10次
WE0115 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶) 200U|1000U
WE0129 一步法RT-PCR试剂盒 100次
WE0144 实时荧光定量PCR的预混体系(探针法) 1ml|5ml
WE0151 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针) 1ml|5ml
WE0160 超纯dNTP混合液(10 mM) 1ml|5ml
ALH609 高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料) 1ml|5ml
ALH284 2.5mM dNTP混合溶液 1ml|5ml
RFT106 随机六聚体引物 100μl
SY0034 热启动PCR Master Mix(含染料) 1ml×5
SY0050 通用型全血PCR试剂盒 50T
JN0047 2×PCR MasterMix(防污染) 1ml×5
QN0525 dATP(100mM) 400μl
QN0949 2×SYBR Green PCR Mastermix 50T|200T
MT0033 9°N DNA聚合酶(无外切酶活性) 100U|1000U
MT0034 5×PCR增强剂 1mL
MT0036 超纯dNTP混合物(10mM) 1mL