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500 mL
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文献和实验吸出培养基,吸得越干净越好,直接加入1ml胰酶(T-25瓶),放到37度培养箱消化。是否需要用hanks 或 pbs之类得缓冲洗细胞并不绝对必要,我都没有洗,感觉应该洗一下更好,但也更麻烦并增加了污染得可能性。如果细胞长得太老,可以先加入1ml胰酶在细胞表面浸润一下就吸出来,然后再加入1ml胰酶消化。胰酶在使用前最好预热到37度。由于胰酶平时保存在4度,反复预热对胰酶的活性不好,我的经验是将胰酶进行分装,尽可能避免胰酶反复冷却加热。消化时间的选择要根据实际情况决定,BHK-21还是比较好消化
1、吸尽旧的培养液(因为我是养在培养皿)2、用D-HANKs清洗一次3、加入0.125%/0.02%EDTA的胰酶(盖满皿底即可)。肉眼观察即可,看见皿底有一层薄雾。4、加入完全培养基,以终止胰酶作用。5、轻轻反复吹打细胞。6、吸出一部分加入新的培养皿中。注意:1、可以用MEM或DMEM2、EDTA可使细胞分散3、BHK-21生长迅速
【摘要】 目的 比较无血清培养基(AIMV)与完全培养基(CM)体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法 分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果 与完全培养基比较,无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14~17天),但增殖倍数高
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