
毕赤酵母蛋白表达服务
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- 2025年07月11日
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酵母系统蛋白表达项目合作 BP204
毕赤酵母蛋白表达服务
酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠,糖基化修饰等能力,使得蛋白可溶性大幅度提高,为蛋白的生理活性研究提供了强有力的工具。我们拥有丰富的酵母表达和纯化系统,致力于表达条件的优化和新方法的摸索,可以为广大科研用户提供完善的服务。
| 酵母系统蛋白表达项目合作 | |||
| 套餐四(BP204) | 与客户共建高效表达的酵母工程菌株和表达体系 | ||
| 客户提供 | 交付标准 | 周期 | 价格 |
| 1、目的基因信息 2、目标蛋白质相关信息 3、蛋白相关文献(酵母体系表达) 4、菌株表达水平预期及要求 5、蛋白量及纯度要求 6、其他具体要求及细节 |
1、目的基因的质粒及亚克隆质粒 |
商议 | |
| 适用客户:适用于工业级别工程菌株构建,建立高效表达菌株的同时,初步确定发酵体系培养条件。 服务说明:依据客户需求,从基因优化起步,确立克隆方案,分别使用至少两种质粒和两种宿主体系搭配,进行高拷贝筛选和表达条件梯度优化,提供原始的实验记录,进行不少于5批次的表达验证,最终提供可以用于初步筛选的酵母工程菌和完整建株方案。 |
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服务内容
1、依据客户要求,设计克隆方案,将客户要表达的蛋白基因克隆到酵母表达载体,客户可以选择分泌表达(如pPICZaA 、pGAPZaA等)或胞内表达(如pPICZA 、pPIC3.5K等)。
2、将构建好的质粒转化到酵母宿主菌,如毕赤酵母或啤酒酵母。
3、PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白表达鉴定。
4、可以依据客户的要求,增加多拷贝转化子的筛选以及蛋白表达优化两项服务内容。
5、根据客户要求纯化重组蛋白。
客户需提供必要的资料
1.待表达蛋白的基因序列。蛋白的基本特性(蛋白来源为分泌蛋白还是胞内蛋白,天然蛋白是否糖基化,蛋白是否稳定,蛋白的pI值等)。
2.所需纯化蛋白的量及用途,要求的纯度以及蛋白标签tag。
3.发货的具体要求:如缓冲液要求,是否冻干等。
更多蛋白表达报价及案例请参见
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文献和实验QIAgene Expression Kit——再也不为重组蛋白的表达效率发愁 据Protein Database的最新数据表明,目前已知的人类蛋白有35,000种(包括splice variants),大约33%的蛋白正处于研究中,但是只有8%的蛋白能够成功表达。统计数据同时显示,目前克隆,表达,纯化的成功率只维持在54%,74%,59%。所以说,在蛋白表达的漫漫征途中,拿不到想要的蛋白是一件非常普遍的事情。举一个例子来说对于目标蛋白不表达或表达量低这个常见问题,需要排除或检查的因素就太多
E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动子序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态. 在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点.由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。 在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏
)等过程,而这些过程在癌变细胞中都是有可能发生改变的。 xiayuxue 谢谢 luke751751 首先要考虑蛋白检测方法是否有问题,比如说是否进行了蛋白的定量,是否有和内参的比值。如果一切正常的话,再;考虑mRNA转录和蛋白表达的差异,对很多基因而言,正如楼上说的,基因的转录和表达是两码事,中间受到很多因素的影响。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为
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