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- 和序生物
- PriMed-HX-019
- 2025年12月28日
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- 文献和实验
- 技术资料
HX原代成骨细胞培养体系是一个为体外生长的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的成骨细胞设计的理想的完全培养基方案。本体系是一个基于碳酸氢盐的缓冲体系，可以在孵育的5%的CO2的气体环境下维持一个围绕pH7.2的酸碱缓冲体系。本体系是一个无菌的液体混合系统，其中包含必须和非必须氨基酸、维生素、激素、生长因子、微量元素和一些其他的有机和无机化合物以及一个低浓度的胎牛血清（2%）。本培养体系是基于固定配方配制的液态培养体系，可以为体外培养的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的成骨细胞提供一个确定适宜的平衡营养环境，并且可以选择性的促进成骨细胞的扩增。
体系组成：
| 名称 | 体积 | 浓度 | 保存条件 |
| 原代成骨细胞基础培养基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
| 原代成骨细胞培养添加剂 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
| 胎牛血清（FBS） | 10ml | 终浓度2% | -20℃、避光 |
| 双抗（青霉素/链霉素，P/S） | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
运输和保存：
放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输（体系中的各组分请按上述列表中的条件进行储存）
产品使用：
- 本产品仅能用于科研
- 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
- 本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验实验材料： 1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2。 实验方法： 1. 取生后1—2d大鼠若干只，拉颈处死
实验材料： 1. 骨组织来源：手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2. 实验方法：
我曾经做过原代培养的成骨细胞传代和骨髓基质细胞以及cos7细胞的传代。基本的操作过程都是：倒掉或者吸掉培养基37度预温的PBS洗涤细胞3次加入浓度为0.1％的胰酶和0.05％EDTA进行消化，添加的量看所用的培养瓶大小，可以在室温下消化，也可以在37度进行消化在显微镜下观察，等细胞成片脱离时，加入3毫升含血清培养基中止消化将细胞悬液转移到离心管中1000rpm离心5分钟收集细胞弃上清，再加入5毫升含血清培养基重悬细胞，再同样转速和时间离心一次弃上清，根据实际需要添加适量培养基重悬
