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大鼠谷氨酸脱氢酶(GDH/GL
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Serum, plasma, tissue homogenates and other biological fluids
ELISA Kit for Glutamate Dehydrogenase 1 (GLUD1)
大鼠
ELISA
0.312-20ng/mL
上海研卉生物科技有限公司
大量
96T
本试剂盒用于检测谷氨酸脱氢酶(GLUD1),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。 由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的谷氨酸脱氢酶(GLUD1)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100 批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批内差: CV<10% 批间差: CV<12%
在定值血清及血浆样本内加入适量的谷氨酸脱氢酶(GLUD1),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中谷氨酸脱氢酶(GLUD1)含量的测定值与理论值的比率。
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。 为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备; 2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时; 3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时; 4. 洗板3次; 5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟; 6. 洗板5次; 7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟; 8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
将谷氨酸脱氢酶(GLUD1)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的谷氨酸脱氢酶(GLUD1)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的谷氨酸脱氢酶(GLUD1)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷氨酸脱氢酶(GLUD1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
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