- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB0221-100S
- 进口/国产
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
EGY48感受态细胞
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
| 编号 | 名称 | 规格 |
| YB0221-100S | EGY48感受态细胞 | 10*100UL |
| YB0221-100 | EGY48感受态细胞 | 20*100UL |
注意：-70℃，避免反复冻融，影响转化效率。
EGY48酵母菌感受态细胞
规格： 100ul
EGY48 Chemically Competent Cell 产品说明书
EGY48酵母菌感受态细胞
产品规格
EGY48： 10*100ul 保存条件：-80℃
PGADT7（control vector）：10ng/ul 10ul 保存条件： 4℃
Carrier DNA： 5ug/ul 120 ul 保存条件： 4℃
PEG/liAC： 5 ml 保存条件： 4℃
DMSO： 300 ul 保存条件： 4℃
EGY48酵母菌感受态细胞
基因型MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2
产品简介：
产品说明
EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，MATα型，可转化质粒或mating操作。Transformation marker为: his3, trp1, ura3 ，报告基因为：LEU2 。经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/ug DNA。
EGY48酵母菌感受态细胞
操作方法
1. 取100 ul冰上融化的EGY48感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）12 ul ，PEG/liAC 500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min翻转6-8次混匀）。
2. 加入DMSO 30ul 轻轻混匀。
3. 将管放42度水浴15min （7.5 min翻转6-8次混匀）。
4. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。
5. ddH2O 50ul重悬，涂板。
EGY48酵母菌感受态细胞注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
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文献和实验体积无水乙醇;1/10体积3.0M NaAc(pH5.2)，于-20℃静置过夜。 13. 离心12500xg×20min，4℃，去除上清，沉淀用70%乙醇洗涤，超净台风干。 l)，保存于-20℃。mg/管(用于1次转化反应，约40m14. 干燥的DNA溶于适量体积TE，定量，分装100-200 构建于DNA-BD载体的目的DNA转化酵母感受态细胞 1. 将酵母菌EGY48(p8op-lacZ)接种于5.0ml SD/-Ura液体培养基中，缓振打散菌落
Two-hybrid analysis of genetic
bait plasmid and a URA3 lacZ reporter plasmid like pSH18-34.The strain expressing the activation domain-tagged protein (prey strain)is EGY48 (MATa ura3 his3 leu2::3LexAop-LEU2 trp1 LYS2)transformed with the TRP1 prey plasmid.Patches of these two strains
去阳性克隆，保留阴性克隆。3. 酵母杂合试验(Yeast Mating)确定真阳性克隆 如下表所示，在酵母EGY48及其对应的YM4271宿主细胞中分别转入相应的质粒或文库DNA，通过杂合实验确筛选pLexA-靶DNA与pB42AD-文库确实具有相互作用的真阳性克隆。 质粒1 (in YM4271) 质粒2 (in EGY48) LacZ表型 Leu表型 pLexA pB42AD 白 不能生长 pLexA-靶DNA pB42AD 白 不能生长 pLexA pB42AD
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