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- 载体构建
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- 2025年07月14日
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- 服务名称：
不同融合/非融合表达载体的构建及亚细胞定位
- 提供商：
武汉思特进
荧光类载体：
1. pEGFP-N1: 经典绿色荧光融合表达载体，特点：弥散，单聚体，荧光明亮。
2. pmCherry-N1: 新一代红色荧光融合表达载体，克服了红色荧光蛋白聚集的现象，弥散而明亮。
3. pCerulean-N1: 蓝色荧光融合表达载体，pECFP-N1 的改良版。
4. pVenus-N1: 黄色荧光融合表达载体，pEYFP-N1 的改良版。
5. pIRES2-DsRed2: 新一代红色荧光非融合表达载体，克服了红色荧光蛋白聚集的现象，弥散而明亮。
6. pIRES2-EGFP: 绿色荧光非融合表达载体，特点：弥散，单聚体，荧光明亮。
标签类载体：
1. pcFLAG-C
2. pcHA-C
您如果想做IP 或者细胞免疫组化实验却不想购买特异基因的抗体，请选择构建标签载体，买标签的抗体，
适用于不同的基因，既经济又高效。
其他表达类载体：
1. pcDNA3.1 (+/-): 最常用的基因表达载体，单独的读码框，无荧光或标签蛋白的干扰。实用于做超表达后基因上下调的实验研究。
2. pVITRO1-neo-mcs: 双基因表达载体。功能强大的双基因表达载体，如果您正在为基因共表达而困扰，
如果您做双质粒共表达的时候总出现其中一个表达优势的情况，请您选择让我们将您把两个目的基因
装入同一个表达载体中，这个表达载体内具有两套独立的表达系统，两个启动子，不带任何干扰蛋白，
是您做基因共表达的最佳选择。
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文献和实验子CaMKIIa，星型胶质细胞特异性启动子GfaABC1D，心肌特异性启动子cTNT，肝实质细胞特异性启动子TBG等。(2) 荧光：针对编码蛋白，常规推荐目的基因和荧光蛋白非融合表达，通过荧光观察感染效率。若需要用荧光标记目的基因的位置，如亚细胞定位等实验时可考虑做目的基因和荧光蛋白融合表达。因蛋白均有自己的空间结构，若选择融合表达，两个蛋白可能会相互影响。融合表达常用结构：非融合表达常用结构：(3) 抗性：A 常用原核抗性：Amp，Kan。B 常用真核抗性：Puro，blasticidin(BSD，BSR
naj2007 请教一下各位老师，在构建过表达载体的时候，VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白，但是如果用不同的启动子的话，很容易丢失荧光，有没有什么解决方法。 zhujoker 可以做成融合蛋白的，即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的，大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV，EF1a之类。 kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做
（金色）或 CLIP-tag（紫色）与目标蛋白融合表达后，与标记物 X 发生自我标记，附属产物是鸟嘌呤或胞嘧啶。 特点： ● 方便 - 单次克隆表达后，可标记不同底物 ● 快速 - 标记方法简便 ● 特异性高 - 无需纯化，背景低 ● 准确 - 标记反应是在生理条件下形成特定位点的共价键 ● 无毒 - 底物对活细胞无毒性 ● 直接共价键标记 - 不需抗体和反复清洗 ● 选择范围广 - 大量不同且已为不同成像仪优化的底物可供选择
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