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皮肤指身体表面包在肌肉外面的组织,是人体最大的器官,主要承担着保护身体、排汗、感觉冷热和压力等功能。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。
成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养,它们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言,成纤维细胞能够分泌I型和III型胶原等细胞外基质,并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时,真皮成纤维细胞由可增殖,可迁移的表型变为有收缩性的,可重塑基质的表型,同时,它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。
细胞特性:
- 细胞来源于手术切除的正常包皮组织。
- 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性。
- 经鉴定细胞纯度高于90%。
- 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
- 细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
- 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
- T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基:
我们推荐使用HX原代成纤维细胞培养体系(产品编号:PriMed-HX-003)作为体外培养原代真皮成纤维细胞的培养基。
产品使用:
- 本产品仅能用于科研
- 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
- 本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验正常 小鼠原代真皮纤维原细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:抗小鼠Fibronectin
实验材料: 1. 正常动物皮肤 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 细胞培养瓶(T25) 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 取正常动物皮肤,置于小培养皿内,用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛发; 2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm3 左右大小,再用PBS漂洗3次; 3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁
分离表皮和真皮,然后再用PBS缓冲液分别冲洗表皮和真皮2-3次,剪碎;10、表皮细胞获取:剪碎的表皮组织用0.25%的胰酶37℃消化15-20min;用移液枪吹打消化组织若干次,吸出漂浮的表皮,1000rpm离心5min;吸出上清,加入K-SFM培养基,吹打混匀,计数,调整细胞浓度后接种。11、真皮细胞获取:剪碎的真皮组织用0.2%的胶原酶37℃消化30min,;用移液枪吹打消化组织若干次,200目筛过滤除去多余组织,1000rpm离心5min收集真皮细胞,吸出上清,加入含20%新生





