手机验证
559
Instant Fluorescent qPCR Kit
6个月
北京百奥莱博科技有限公司
低温运输,-20℃保存,保存期限为6个月。使用方法:1.以20μl的qPCR反应体系为例:在一干净的PCR管中,加入下列成分:<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>反应体系成分<td>20μl体系<td>终浓度<tr><td>qPCR MagicMix,2×<td>10μl<td>1×<tr><td>自备引物一<td>xμl<td>0.1-0.5μM<tr><td>自备引物二<td>xμl<td>0.1-0.5μM<tr><td>自备模板<td>xμl<td><tr><td>自备ROX<td>2μl<td>(可以不加)<tr><td>补超纯水到<td>20μl<td></table>放入荧光PCR仪中进行扩增,并在退火或延长步骤中记录荧光信号。注意:a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考;通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。b)ROX 校正染料:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。两步快速循环法:适用于引物Tm值设计为60℃的反应<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>循环步骤<td>温度<td>时间<td>循环数<tr><td>酶活化<td>95℃<td>10min<td>1<tr><td>变性<td>95℃<td>15s<td rowspan=2>35-40<tr><td>退火&延伸<td>60℃<td>1min</table>注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>循环步骤<td>温度<td>时间<td>循环数<tr><td>酶活化<td>95℃<td>10min<td>1<tr><td>变性<td>95℃<td>10s<td rowspan=3>35-40<tr><td>退火<td>56-64℃<td>30s<tr><td>延伸<td>72℃<td>32s</table>注意:·退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。·延伸温度:延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT含量大于70%的扩增子来说,延伸温度设为60℃为宜。通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>循环步骤<td>温度<td>时间<td>循环数<tr><td>酶活化<td>96℃<td>10min<td>1<tr><td>变性<td>96℃<td>15s<td rowspan=2>35-40<tr><td>退火&延伸<td>60℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒厂家直销用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多即用型荧光定量PCR试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒厂家直销
编号:BTN90408
规格:1mL
英文名:Instant Fluorescent qPCR Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。
产品特点:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。
3.快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
易错PCR Mix,10× | 300μl |
易错PCR专用dNTP,10× | 300μl |
MnCl2,5mM | 300μl |
说明书 | 1份 |
反应体系成分 | 20μl体系 | 终浓度 |
qPCR MagicMix,2× | 10μl | 1× |
自备引物一 | xμl | 0.1-0.5μM |
自备引物二 | xμl | 0.1-0.5μM |
自备模板 | xμl | |
自备ROX | 2μl | (可以不加) |
补超纯水到 | 20μl |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
变性 | 95℃ | 15s | 35-40 |
退火&延伸 | 60℃ | 1min |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
变性 | 95℃ | 10s | 35-40 |
退火 | 56-64℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 32s |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 96℃ | 10min | 1 |
变性 | 96℃ | 15s | 35-40 |
退火&延伸 | 60℃ | 1min |
我公司正在火爆促销核酸扩增(PCR)系列产品,欢迎您的垂询选购北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒厂家直销。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。