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- 库存:
大量
- 英文名:
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃避光保存,避免反复冻融。孵育缓冲液2-8℃保存
- 规格:
50T/100T
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒
产品概述
-
储存条件:
2-8℃保存。
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒有效期:
一年。细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒产品简介:
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性极高(在250℃下干热灭菌2h 才完全灭活)。受LPS 发现的历史原因,如今LPS 的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS 由多糖链和脂质A 组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A 主要影响LPS 的毒性作用。LPS 可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS 的存在来诊断脑膜炎。
由于LPS 与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS 进行相关的研究,如阐明LPS 的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。
本试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖,提取产量高,省时,蛋白质和核酸污染低。
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- 内容
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文献和实验细胞/细菌总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP430) ——细菌
以下操作按照天根产品 DP430 细胞/细菌总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 细菌培养液,溶菌酶(RT401,客户自备,提取细菌总RNA时需配备。)2. 无水乙醇 ,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml)1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋
,成本相对较高; 两者各有各的优势,可根据实验数据要求及实验室条件选择合适的方法,也可结合两种方法兼顾效率与准确性。 2. 质粒中内毒素残留对下游实验的影响 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分,又叫脂多糖(LPS)。脂多糖对于宿主是有毒性的,当细菌破碎时,会释放到环境中。在细胞转染中,高内毒素会与 DNA 竞争转染试剂,从而减少质粒 DNA 的摄入量,导致转染效率下降。内毒素具有两亲性和负电荷性,性质类似于 DNA,因此在质粒纯化过程中容易伴随质粒一同被纯化出来。在细胞培养中,内毒
,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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