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实验材料
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| 试剂 | 公司 | 产地 |
| 肿瘤细胞株 | 购自上海中科院典型培养物保藏委员会细胞库 | 中国 |
| DMEM培养基 | HyClone | 美国 |
| 胎牛血清 | Gibco (ThermoFisher) | 美国 |
| 胰蛋白酶 | Gibco (ThermoFisher) | 美国 |
| PBS | Gibco (ThermoFisher) | 美国 |
| 安尔典皮肤消毒剂(碘伏) | 上海利康消毒高科技有限公司 | 中国 |
| 10%福尔马林 | 国药集团化学试剂 | 中国 |
| 5%水合氯醛 | 国药集团化学试剂 | 中国 |
- 动物来源
| 种系 | 性别 | 周龄 | 体重 | 来源 | 数量 |
| Balb/c NOD 裸鼠 |
雄性 | 8w+ | 20±2g | 上海斯莱克实验动物有限责任公司 |
- 设备
| 试剂 | 公司 | 产地 |
| 细胞培养箱 | Healforce | 美国 |
| 移液器 | Gilson | 德国 |
| 电热恒温水浴锅 | 上海一恒实验设备有限公司 | 中国 |
| 一次性培养皿,培养瓶,移液管等 | BD Biosciences, San Jose | 美国 |
| 耗材(EP管等) | Axygen | 美国 |
| 超净工作台 | 苏净 | 中国 |
| 核酸浓度测量仪 | Gibco (ThermoFisher) | 美国 |
| PCR仪 | Applied Biosystems-2720terminal cycler | 美国 |
| 实时荧光定量PCR仪 | Applied Biosystems-7900HT | 美国 |
| 无菌手术剪刀 | 扬州市金环医疗器械厂 | 中国 |
| 镊子 | 扬州市金环医疗器械厂 | 中国 |
| 缝合针 | 扬州市金环医疗器械厂 | 中国 |
| 缝合线 | 扬州市金环医疗器械厂 | 中国 |
| 格尺 | 扬州市金环医疗器械厂 | 中国 |
| 数显游标卡尺 | 哈尔滨量具刃具集团有限责任公司 | 中国 |
| 微量进样器 | 上海安亭微量进样器厂 | 中国 |
实验方法
- Balb/c NOD裸鼠皮下成瘤模型
- 将Balb/c NOD小鼠背侧靠近前端左、右两边的毛发用酒精消毒;
- 用刀片轻轻踢掉毛发;
- 取1×107个数量的肿瘤细胞,接种入双侧上肢腋下的表皮层下;
- 放回笼内保温,直至苏醒,正常饲养;
- 每5天记录肿瘤大小曲线至Day 30,取瘤体拍照记录,福尔马林固定;
研究实例:
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文献和实验裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式,接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。 楼主看来是做体外培养的细胞的裸鼠接种,一般用带 6 号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下,部位看试验要求而定,一般在腋下或背部皮下,每个接种部位注射 0.1-0.2 ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或 PBS 中,放于冰盒中携至动物房,直接注射即可。 是牵涉到细胞株的成瘤性问题,可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。一般细胞浓度可在 1*10
实验目的: 通过 DIR 染料标记外泌体,通过尾静脉注射 DIR-labeled Exosome,24 小时内观察外泌体在体内的代谢情况。 实验材料: DIR- Exosome,裸鼠; DIR-Exosome:染料终浓度 1uM,外泌体 200ug,体积 200ul; Exosome 来自 HEK293 无血清培养基(Umibio,UR51102)条件下获得,通过外泌体提取试剂盒提取(Umibio,UR52121)。 实验内容: 1、通过尾静脉注射 200 ug/支的 DIR- Exosome
一、裸鼠可能也长毛 裸鼠不是体表无毛,其毛囊与同窝出生的正常有毛鼠相比,从组织学切片来看,毛囊数量和功能均没有差别,能够产生正常的毛根和毛杆。对于纯合子来说,由于 Foxn1 基因功能缺失,毛杆中缺乏角蛋白(由 Foxn1 控制表达)变得非常纤弱,绝大部分毛杆不能正常穿透表皮,而是扭曲盘绕在膨胀的毛囊漏斗内。因此,皮肤眼观上为光裸的,但实际上裸鼠出生后约 10 天左右,在头部、颈部可见稀疏的毛发生长。随着周龄增加,在躯干的其他部位也可见稀疏毛发生长。这些穿透了表皮的毛杆也是严重扭曲的,而且经常
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