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- 上海
- 2026年01月02日
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百致生物医药科技（上海）有限公司
- 规格：
只
大鼠MCAO模型构建
动物适应性喂养
动物自购回后保持动物房12h-12h昼夜交替，保持动物自由饮水、进食，温度23-25℃，适应性喂养一周后进入实验。
大鼠MCAO模型构建
参照改良Zea Longa线栓法构建大鼠MCAO模型。大鼠术前12h禁食不禁水。
大鼠称重，7%水合氯醛（0.5ml/100g）腹腔注射麻醉，颈前部备皮、消毒，行颈正中切口，钝性分离右侧皮下组织及肌肉暴露出颈总动脉，眼科镊小心分离伴行于颈总动脉的迷走神经及动脉周围粘膜组织，分离出颈总动脉大约1~1.5cm。继续向头部分离，小心剔除覆盖于动脉上方的黏膜组织，可见颈外动脉、颈内动脉与颈总动脉呈“Y字形”分布，游离出独立的颈内、外动脉。结扎颈外动脉及颈总动脉近心端，颈内动脉埋线并用动脉夹暂时夹闭。在颈总动脉近心端结扎处剪一“V”形切口，用眼科镊夹持栓线由颈总动脉进入颈内动脉，到达动脉夹时，将埋线稍微拉紧（防止渗血），松开动脉夹，继续插入栓线，当特制栓线黑色标记处到达Y字形分叉口附近时，此时栓线已进入大脑中动脉且不能继续前行。
栓线插入完毕后，将预留的结扎线拉紧固定。医用棉签清理颈部血块，缝合皮肤，酒精棉球消毒，将大鼠放回笼子。90min过后，麻醉大鼠，颈部消毒，打开一个小口，用眼科镊夹住栓线固定处将栓线拔出约1cm实现血流再灌注，剪去多余栓线，逐层缝合。
注意事项：
1）分离颈部肌肉时，两侧小块肌肉叫鼓泡腺体（很多人误认为是甲状腺），避免损伤导致出血。
2）见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经，若损伤则可能影响其呼吸而死亡的。
3）分离血管时，要尽量将血管剥离的干净些，这样在用眼科剪剪口时就不会误剪外膜，且要剪一个斜行的切口。
4）系牢拴线绕在 CCA 远心端的细线时注意掌握力度，不可不扎，否则出血较多，但不可过紧，否则插线困难 。
5）线栓是分几次一点点插进去的，而不是夹住线栓的中间部分一下子插进去的，直到遇到轻微阻力停止插线。
SD大鼠颅脑损伤模型（Feeney 自由落体法）
实验鼠称重，7%水合氯醛麻醉（5ml/kg），头部备皮，俯卧固定于颅脑损伤仪上。手术区酒精棉球消毒，将大鼠头顶部皮肤矢状切开，剥离筋膜，以人字缝前3mm、冠状缝右侧3mm为圆心用颅骨钻钻孔并扩大骨窗（直径5mm），钻孔过程需注意不能损坏硬脑膜，将致伤撞垫轻轻置于骨窗中央的硬脑膜上，用40g的砝码自20cm高处沿滑杆自由落体落下打击撞垫（冲击力为800g·cm），造成大鼠右顶叶局限性脑挫裂伤，骨蜡封窗，缝合头皮。
【百致生物实验服务流程】
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文献和实验本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说很专业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且手术过程中不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。虽然前面有很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌乱，现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总会有郁闷的时候，不过风雨之后总会见到彩虹的，这可以也是我的心得体会。衷心祝福大家能把实验做的成功
如何提高脑缺血的成功率?经常有朋友费了九牛二虎之力，做了几个大鼠MCAO模型，第二天一看，个个活蹦乱跳，毫无脑缺血症状，当场晕。不成功的主要原因是栓线插入深度不够，即栓线的前端未进入大脑前动脉（ACA），拴线的粗细倒是次要的，0.20～0.26mm均可。因此，保证栓线进入ACA并阻断对侧来的血流，而又不刺破血管是重中之重。（一）制备技巧秘诀1：许多文献报道插入深度为18.5±0.5mm（270g左右大鼠），如果按这一标准去做，而不考虑大鼠的个体差异，后果是缺血的程度参差不齐，很多大鼠会出现症状
本人从事脑缺血的基础研究已有15年的历史，从93年开始研究栓线法大鼠MCAO模型，当时国内几乎还没人做这方面的工作，遇到困难无人可求。 仅烧制栓线这一工作就耗了近6个月的时间，功夫不负有心人，我终于发明了一种制备栓线的设备，可以随心所欲控制光滑末端的大小，非常好用，模型的成功率、更死灶的稳定性得到极大改善。 95年在成都召开的《第四届全国脑血管病会议》上作了大会发言，受到同行的极大关注，同行试用我制备的栓线后，都给与很高的评价。 如此光滑的末端
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