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- 2026年01月07日
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免疫共沉淀
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质功能的实验方法。Co-IP是在IP的基础上衍生出来的实验方法，是证明蛋白相互作用的金标准。通过检测免疫沉淀下来的蛋白复合物来证实中是否存在与X蛋白相互作用的Y蛋白。
其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗X蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体FC片段特异结合的Protein A/G-琼脂糖微珠，若细胞中有与Y结合的X蛋白，就可以形成这样一种复合物： Y—X—抗X抗体—Protein A或G ，经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。
实验流程
• 构建相关真核表达载体，转染细胞并获得表达；
• 蛋白质抽提与定量；
• 免疫沉淀（以normal IgG作为对照）；
• 免疫沉淀产物SDS-PAGE和western blot分析；
• 完整技术服务实验报告提交。
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感谢您选择我公司的免疫共沉淀检测服务。如有任何相关的问题，请您联系我们的工作人员，我们即刻为您解答和服务。
其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗X蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体FC片段特异结合的Protein A/G-琼脂糖微珠，若细胞中有与Y结合的X蛋白，就可以形成这样一种复合物： Y—X—抗X抗体—Protein A或G ，经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。
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• 构建相关真核表达载体，转染细胞并获得表达；
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文献和实验相关实验
原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体，孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠，若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N，就可以形成这样一种复合物：“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”，经 SDS
您对蛋白-蛋白互作检测的金标准——免疫共沉淀了解多少？Dr. 赛带您从原理出发揭开免疫共沉淀实验的神秘面纱，手把手教您设置对照，选择固相介质，逐一了解影响免疫共沉淀实验的关键因素。
mijiagaga 有郁闷问题想请教各位大侠： 我做免疫共沉淀，从细胞中提取内源性表达的蛋白，按照常规方法做，可是最后银染总是没有条带？ 多谢多谢！ woxingwosu 有几个问题需要确认一下： 1. 你做免疫共沉淀（IP）的抗体是否可以用。WEstern能识别的抗体不一定能用在IP。 2. 内源性蛋白的表达量。需要先确认一下这个蛋白的表达量，如果这个蛋白本来表达量就很低
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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