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NGB
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细胞免疫荧光染色
欣润生物自主研发的分子生物学,细胞生物学产品,完善的实验条件,先进的设备,高素质的实验人员,100%保证您的实验保质保量完成。
技术流程
1、细胞爬片;
2、细胞固定;
3、细胞透膜;
4、封闭;
5、一抗孵育;
6、免疫荧光二抗孵育;
7、DAPI染核;
8、封片、荧光显微镜拍照
服务流程
• 根据客户所需要目的蛋白和提供的一抗,进行预实验验证一抗的效价。
• 目的蛋白和一抗二抗孵育显色。
• 提供实验报告:包括详细的实验方法及实验结果的相关图表。
交付结果
完整的实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂和相关分析数据
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文献和实验实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原
的能力越强,越不容易感染疾病,但超过一定限度,也容易引发自身免疫性疾病。且机体的免疫组库也不是一成不变的,会随着年龄,环境,药物,患病等等因素,免疫组库多样性也时刻处于动态变化当中。由此,将免疫组库测序用于临床诊断和治疗上,有助于对群体或个体间进行免疫监测,探究相关疾病(疾病感染,治疗,自身免疫疾病等)和免疫应答的关系,监测免疫疗法的效果,研究疾病发生、发展的分子机制。简单来说,单细胞免疫组库解决如下问题: 识别免疫组库序列组成和多样性 探究基因表达情况,发现新的生物标志物 分析样本内/样本间
免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤。 一、zo-1的免疫荧光,步骤如下: 1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%时,从孵箱中取出。2. 用预温的1×PBS洗3次,每次10分钟。3. 4%的甲醛室温固定20-30分钟。4. 1×PBS洗3次,每次10分钟。5. 0.2%Triton X-100透化2-5
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