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- 反转录PCR（reverse transcription PCR
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- 2026年03月22日
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反转录PCR（reverse transcription PCR
一、技术简介
逆转录PCR，或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。（检测基因表达的方法，参见Northern Blot法。
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。随后，DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成，随每个循环倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互补DNA。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种，即鸟类成髓细胞性白细胞病毒（avian myeloblastosis virus, AMV）反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒（moloney murine leukemia virus, MMLV）反转录酶。
二、实验流程
1. RNA抽提。
2. cDNA第一链合成。
3. PCR扩增。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：样本。
2. 公司提供：电泳图、完整报告。
3. 实验周期：5-10个工作日。
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文献和实验[1]Tang R, Mao C, Hu C, Liu W, Bai J, Wang Y, Yang L, Qi H. Exosome membrane-biomimetic nanomedicine targets the pre-metastatic niche via NF-κB inhibition to suppress breast cancer lung metastasis. Mater Today Bio. 2026 Jan 31;37:102856. doi: 10.1016/j.mtbio.2026.102856. PMID: 41696155; PMCID: PMC12906025.
Long Distance Reverse-Transcription PCR
of RT-PCR: the preparation and requirements of the RNA template, the reverse transcription reaction, and the amplification of the cDNA by PCR.
as non-specific binding by the DNA primer is reduced. Reverse transcription reaction product can be used as template for PCR, for generating cDNA library, etc. The single stranded cDNA can be converted to double stranded DNA using
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