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聚合酶链反应(Polymerase Chain Reacti

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      聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)

    一、技术简介
    聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因扩增至百万倍,使肉眼能直接观察和判断。聚合酶PCR实验从微量物质甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。
    类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
    模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。
    模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
    引物的延伸:DNA模板-引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程,就可获得更多的”半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
    二、实验流程
    1. 预变性。
    2. 循环:包括三个步骤(DNA变性,引物退火,引物延伸)。
    3. 最后延伸。
    三、服务说明及结果
    1. 客户提供:样本材料。         
    2. 公司提供:电泳图、完整报告。
    3. 实验周期:5个工作日。

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    该产品被引用文献

    [1]Tang R, Mao C, Hu C, Liu W, Bai J, Wang Y, Yang L, Qi H. Exosome membrane-biomimetic nanomedicine targets the pre-metastatic niche via NF-κB inhibition to suppress breast cancer lung metastasis. Mater Today Bio. 2026 Jan 31;37:102856. doi: 10.1016/j.mtbio.2026.102856. PMID: 41696155; PMCID: PMC12906025.

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