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研载生物
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血管生成实验
血管生成(Angiogenesis)是指源于已存在的毛细血管和毛细血管后微静脉新的毛细血管性血管的生长。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1-2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。小管形成实验是测量在体外血管生成一种快速的,可量化的方法。
二、实验流程
1. 第一天matrigel(BD,354230)放入4℃冰箱过夜。
2. 第二天待matrigel冻融后,离心数分钟。
3. 冰上操作(matrigel不能凝固)。matrigel用预冷枪头混匀,EP管提前预冷,每500μl分装。
4. 96孔板提前预冷,每孔加入50μl matrigel,避免产生气泡。在37℃孵箱放置45分钟。
5. 当细胞长满70-80%时,消化下来,并用含10%FBS的DMEM重悬,每孔加入50μl重悬液,浓度为10000-60000/孔细胞,重复三孔。
6. 37℃孵育,四小时后可见血管形成。
三、服务说明及结果
1. 客户提供:细胞。
2. 公司提供:基本实验步骤、实验统计数据、实验图片结果。
3. 实验周期: 10个工作日。
欢迎来电/邮件垂询
联系人:刘经理
电话:021-54376058
手机:13917998048 (7:00-24:00, 周末节假日不休)
邮箱:yanzaibio@yihaowan.cn, yanzaibio@163.com
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文献和实验为什么要做血管生成实验? 血管生长是肿瘤发生的关键步骤。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2mm,都会有血管生成,这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。 由于肿瘤组织这种新生血管结构及功能异常,且血管基质不完善,这种 微血管容易发生渗漏,因此肿瘤细胞不需经过复杂的侵袭过程而直接穿透到血管内进入血流并在远隔部位形成转移。越来越多的研究表明,良性肿瘤血管生成稀少,血管生长缓慢;而大多数恶性肿瘤的血管生成密集且生长迅速,因此,血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用
【求助】关于血管生成实验参与者:erik想设计一实验研究一蛋白对肿瘤细胞血管生成的影响,但不知道需要几种实验方法同时运用才能说明问题,或者说哪几种是常用的(最好简单易行),我是外行,谢谢指教!参与者:viv2005动脉环,小管生成,鸡胚,这几个比较常用,要么就是直接上动物参与者:erik我的意思是同时做哪几个就可以说明问题,呵呵,谢谢您的回复!参与者:viv2005我们都是一起做的,相互验证,至于做几个就有说服力了,这个没有统一的标准吧,你可以多看看外文文献都是怎么选择。
aoc_chen 大家好,现在打算用BD Growth Factor Reduced Matrigel来做体外血管生成实验,请问这个胶买回来需要稀释吗?文献只说了24孔板每孔加250ul胶,然后上面再铺人脐静脉内皮细胞,我不明白这250ul是稀释后的还是原液?若是稀释后的,是多大比例稀释!不甚感激! ascorpio1 不需要稀释 aoc_chen 谢谢楼上兄弟! roy










