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- 细胞增殖实验/CCK8
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- 2025年12月29日
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研载生物
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细胞增殖实验/CCK8
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板
一、技术简介
细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老和死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。真核细胞的分裂方式有三种，即有丝分裂、无丝分裂和减数分裂。
CCK-8试剂盒是Cell Counting Kit-8的简称。其原理是用WST-8四唑盐（2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)- 3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium）能被活细胞内的脱氢酶还原成橙色甲臜染料，然后测定450 nm下的吸光值，生成的甲臜的量与活细胞数量成正比。
二、实验流程
1. 收集对数期细胞，调整浓度。
2. 将细胞种植于96孔板中，待细胞贴壁后加药。
3. 5% CO2，37 oC孵育一定时间。
4. 每孔中加入10 μL CCK-8溶液，培养1-4 h。
5. 取出96孔板，将其置于酶联免疫检测仪上，震荡15 s，然后在450 nm下测量吸光。
6. 结果统计分析。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：培养好的细胞和作用药物。
2. 公司提供：原始数据及分析结果、完整的实验报告。
3. 实验周期：10个工作日，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。
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文献和实验相比线性范围更宽，灵敏度更高； CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。 四、实验操作指南 1．96孔板每孔加入细胞100 μL（留2个空白组不加细胞，加入同体积的培养基）。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注：A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。 B、培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C
真爱满行囊 我最近在体外细胞做的关于gsk3-beta功能问题，发现药物处理以后，gsk-3-beta的总表达量下调，如果是这样的话 1、我是否能够得出gsk-3-beta的活性下调的结论？ 2、是否还有必要做非活性形式的表达量？我的理解是，基础状态下，gsk-3beta维持的是低活性状态，如果总量都下调了，那应该能够得出活性降低的结论了吧？ 3、另外，在这种情况下我是否有必要去做gsk-3-beta的216位点的活性形式的表达
表观遗传是指 DNA 序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表型却发生了改变。换言之，这是一种 DNA 序列外的遗传方式。因素如 DNA 甲基化、组蛋白修饰和 miRNA 是对环境刺激因素变化的反映，这些表观遗传学因素相互作用以调节基因表达，控制细胞表型，所有这些表观遗传学因素都是维持机体内环境稳定所必需的，有助于正常生理功能的发挥。 组蛋白的翻译后修饰不仅与染色体的重塑和功能紧密相关，而且在决定细胞命运、细胞生长以及致癌作用的过程中发挥着重要的作用，如组
