Western blot一抗稀释液试剂盒

Western 实验步骤

BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min

Western blot 实验技巧精要

Western blot 实验技巧精要 ——轻松获得高质量 western blot 条带图 Western blot 方法在 SCI 文章中出现的频率非常高，漂亮的 WB 电泳图可以给文章增色不少。但是 WB 实验的步骤琐碎，细节颇多，要想得到令人满意的结果还是需要花费很多时间和精力去摸索实验技巧的。 小编经过了一段时间的努力，已经可以比较轻松的实现用 WB 方法对磷酸化蛋白计算药物的 IC50 值（见下图）。 接下来，小编将结合自己的经验以及网上可以搜索

Western-blot实验操作手册

洗片。 8.Western Blot问题解答： 无显色信号问题的原因分析： 1.裂解产物中抗原含量不足 a. 抗原无表达或表达量过少 b. 蛋白降解或上样量不足 c. 裂解产物制备失误 2.制胶浓度比例不合适。 3.转膜不完全 4.一抗稀释浓度过大 5.二抗与一抗不匹配 6.显色系统灵敏度不足 非特意性杂带出现的原因分析： 1.封闭或清洗不彻底