YT071型Western一抗二抗清除剂(强碱性)哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括YT071型Western一抗二抗清除剂(强碱性)哪里卖在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：YT071型Western一抗二抗清除剂(强碱性)哪里卖
英文名：Antibody Stripping buffer(Strongly alkaline)
编号：YT071
品牌：百奥莱博
规格：250ml
产地：国产|进口
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约15-20分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

抗体清除剂选型表：

 

产品编号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗清除剂(强碱性)	Western一抗二抗清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗清除剂(中性)	Western一抗二抗清除剂(酸性)
产品包装	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15-20分钟	20-30分钟	20-30分钟	40-80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT071N。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
　　对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。

注意事项：
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白。
2. 为取得最佳效果，推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

储存条件：室温，有效期一年。

想要了解更多关于YT071型Western一抗二抗清除剂(强碱性)哪里卖的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·LKB1-AMPK激活剂(Metformin)(二甲双胍)
编号：YT334
英文名称：LKB1-AMPK Activator
规格：1g|5g
本品可以激活LKB1-AMPK(AMP-activated protein kinase)等信号通路，包括后续的ACC(acetyl-CoA carboxylase)，继而抑制肝脏的糖异生，促进脂肪酸氧化，改善胰岛素敏感性，降低血糖水平。Metformin不具有促进胰岛β细胞分泌胰岛素的功能。Metformin抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡的作用也和其对LKB1-AMPK途径的激活密切相关。

CAS：1115-70-4
分子式：C4H11N5•HCl
分子量：165.62
纯度：＞97%

储存条件：4℃。

·HDAC抑制剂(组蛋白去乙酰化酶抑制剂)(丁酸*)(Sodium Butyrate)
编号：YT321
英文名称：Histone Deacetylase Inhibitor
规格：1g
本品是一种HDAC(Histone deacetylase，中文名称是组蛋白去乙酰化酶)抑制剂。Sodium Butyrate是一种短链脂肪酸盐，可以不依赖于p53途径诱导结肠癌细胞凋亡，同时可以诱导多种细胞的细胞凋亡；可以抑制c-myc基因的剪接，从而干扰其信号转导途径及*离子从细胞内*库的释放。Sodium Butyrate可溶于水。

CAS：156-54-7
分子式：C4H7O2Na
分子量：110.09
纯度：＞99%

储存条件：-20℃，有效期一年。


·兔抗Integrin β1/CD29抗体
编号：YT733
英文名称：Integrin β1/CD29 Rabbit Polyclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于兔的抗Integrin β1/CD29的多克隆抗体。
宿主：兔
克隆性：多克隆抗体
用途：WB,FC, IHC
交叉反应性：人，小鼠
分子量：100KDa
推荐稀释比例：WB(1:500-1:1000),IHC(1:200),FC(1:100)
 

About this Antibody
Name	Integrin β1/CD29 Rabbit Polyclonal Antibody
Category	Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody
Isotype	IgG
Purification	Peptide affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to CD29.
Gene ID	3688
SwissProt	P05556
Synonyms	CD29; FNRB; Fibronectin receptor beta subunit; ITB1; Integrin VLA-4 beta subunit; Integrin beta-1 precursor; integrin beta-1
Category	Adhesion/ECM
Background	Integrins are transmembrane receptors that mediate the attachment between a cell and its surroundings, such as other cells or the extracellular matrix (ECM). Integrins are obligate heterodimers containing two distinct chains, called the α (alpha) and β (beta) subunits. The molecular mass of the integrin subunits can vary from 90 kDa to 160 kDa. Beta subunits have four cysteine-rich repeated sequences. Both α and β subunits bind several divalent cations. Integrins have two main functions: Attachment of the cell to the ECM and signal transduction from the ECM to the cell. However, they are also involved in a wide range of other biological activities, including immune patrolling, cell migration, and binding to cells by certain viruses, such as adenovirus, echovirus, hantavirus, and foot and mouth disease viruses. Research studies have implicated β1 integrin in various activities including embryonic development, blood vessel, skin, bone, and muscle formation, as well as tumor metastasis and angiogenesis.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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28718-90-3 4",6-二脒基-2-*基吲哚 DAPI
ARB10262 人丁型肝炎IgG(HDV IgG)Elisa定量检测 Human hepatitis d virus igg,hdv igG ELISA KIT
BTN100539 胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液 Chymostatin Solution
53-84-9 NAD 氧化型辅酶Ⅰ
F020203 山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a
F030203 HRP标记小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG Fab*HRP
9032-75-1 PectolyaseY-23 果胶酶Y-23
PY02-302  PYG液体培养基基础  250克  
丙*(代"酮")酸 AIBI 127-17-3
ARB10395 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)含量测试 Human soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
乙二*(代"胺")四乙酸三* BIS-TRIS propane 150-38-9
ARB13376 牛病毒性腹泻抗原(BVD Ag)含量检测 
ARB11960 大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)酶联免疫定量检测 Rat bcl-2 associated x protein,bax ELISA KIT
ARB12141 大鼠生长激素释放肽ghrelIn(GHRP-GhrelIn)Elisa分析 Rat growth hormone releasing Peptide-ghrelin,ghrp-ghrelin ELISA KIT
ARB14133 人SlIt2 Elisa方法检测 
纤维素酶(绿色木霉) Sodium malonate monohydrate 9012-54-8
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·蛋白质分子量标准(14.4-116kD)
编号：YT627
英文名称：Protein Marker(14.4-116kD)
规格：200μl|1ml
本品包含了从14.4kD到116kD共7种纯化的蛋白质(见下图)，适合作为SDS-PAGE的蛋白质分子量标准。一个包装的本产品后续如果用于考马斯亮蓝染色，大约可以使用约20-40次。

产品特点：
1. 本蛋白质分子量标准已经配制在1X SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用。
2. 根据上样孔的大小，本蛋白质分子量标准通常每次上样5-10微升，就可以用染色观察到非常清楚的蛋白条带。


本蛋白Marker包含7个条带：14.4kD，18.4kD，25kD，35kD，45kD，66.2kD，116kD

注意事项：
1. 本蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制，不适用于非变性PAGE胶。
2. Western实验时，建议使用百奥莱博的彩色预染蛋白分子量标准(YT621、YT622)，以便更好地观察转膜效果。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·基因定点突变试剂盒
编号：YT027
英文名称：Site-directed Gene Mutagenesis Kit
规格：10次
本试剂盒可以用于点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)。

本试剂盒是一个利用目前最新的基因点突变技术设计而成的试剂盒。只需通过基于PCR的突变质粒的合成，和基于Dpn I的模板质粒的消化，转化培养以及后续的酶切或测序鉴定，即可得到预期的突变质粒(参考图1)。累计操作时间不足2小时即可完成基因的定点突变。



参考上图，使用本试剂盒时需要先设计长度通常为30个碱基以上的互补的两个引物，在引物中含有预期的突变位点。然后以待突变的质粒为模板，用这两个引物进行PCR扩增反应。这样可以产生含有预期的突变位点的双链质粒，但这个双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌，在细菌中会被甲基化修饰，而在体外通过PCR扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶Dpn I处理，可以消化掉待突变的质粒模板，而使通过PCR扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。这样把Dpn I处理过的产物转化细菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。

本试剂盒提供了DH5α甘油菌，可用于感受态细菌的制备。

试剂盒组份：
 

Pfu DNA Polymerase	10μl
Reaction Buffer(10X)	100μl
dNTP Mix(2.5mM each)	50μl
Dpn I	10μl
DH5α 甘油菌	200μl
Nuclease-Free Water	1ml

储存条件：-20℃，有效期一年。

使用说明：

1. 引物设计：
用于特定基因突变的引物需要单独设计，请参考如下一些基本原则进行设计：
(1) 共需设计两条互补的引物。可以先集中设计一条，然后就可以得到互补的另一条引物。
(2) 引物的长度通常为25-45个碱基。
(3) 引物中突变位点任何一侧都必需满足 4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数) ≥45。但引物也不宜过长，否则通常会形成非常稳定的二级结构。通常把突变位点两侧的碱基数控制在15个左右，且使两侧按照上述计算得到的数值相近。
例如引物为agtcaggccaattcgaagcagtcgaattgccaag，其中蓝色的aag为突变位点，则
左侧：4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数)＝4X8＋2X7＝46≥45
右侧：4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数)＝4X8＋2X8＝48≥45
(4) 在可能的情况下，尽量把引物的GC含量控制在40％-60％。
(5) 在可能的情况下，尽量使引物不要产生非常稳定的二级结构和引物二聚体。二级结构和二聚体可以通过一些软件进行分析。
(6) 最好使用经过PAGE纯化的引物或更高纯度的引物。

2. 引物的配制：
如果合成得到的一个引物A的量是20nmol，另外一个互补引物B的量是19nmol。在引物A中加入200微升水，配制成浓度为100µM，在引物B中加入190微升水也配制成浓度为100µM。吸取20微升100µM引物A和20微升100µM引物B到一新的离心管中，再加入160微升水，混匀后即可得到可以直接用于基因定点突变反应的引物(10µM each)。

3. 待突变模板质粒的选择：
选择GC含量在40-55％的待突变模板质粒，并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果GC含量过高，请先把目的基因克隆到其它合适的载体上，再进行基因定点突变反应。另外目的基因GC含量最好也在40-55％的范围，并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果目的基因GC含量过高，而突变位点不在高GC含量区域，可以先把该基因的不含高GC含量的一个区域克隆出来，进行定点突变，然后再把突变后的片断克隆回原基因中。如果必需使用高GC含量的质粒模板，或者有局部高GC含量的质粒模板，请另外使用专门用于高GC含量模板的PCR反应试剂。
必需使用从dam＋的大肠杆菌(这类菌中质粒可以被甲基化)中抽提得到的质粒用于基因定点突变。常用的大部分大肠杆菌都是dam＋的，包括DH5α、JM109等。

4. 基因定点突变反应：
(1) 如下设置基因定点突变反应体系：
Nuclease-Free Water———>?µl
Reaction Buffer (10X)——>5µl
引物 (10µM each)————>2µl
dNTP Mix (2.5mM each)——>4µl
待突变模板质粒(0.5µg)——>?µl
总体积——————————>49µl
按照上面的顺序依次加入各种试剂。在上述反应体系中，根据待突变模板质粒的量，计算出需加入的Nuclease-Free Water的量，使总体积为49微升。适当混匀后，加入 1 ul Pfu DNA Polymerase，混匀。如果用的PCR仪没有热盖，在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
(2) 按照如下参数设置PCR仪：

步骤	循环数	温度	时间	说明
1	1	95℃	1分钟	最初变性
2	18	95℃	40秒	变性
		60℃	1分钟	退火
		68℃	1分钟/kb	延伸
3	1	72℃	10分钟	延伸、补全
4	1	4℃	长时间保持	暂时存放

说明：上面表格中1分钟/kb表示，如果待突变的质粒为6kb，那么68℃的延伸时间为6分钟。

5. Dpn I消化：
PCR反应后，直接在PCR反应体系中加入1微升Dpn I，混匀后37℃孵育1小时。37℃孵育可以在PCR仪上进行，也可以在水浴锅中进行。Dpn I消化完毕后可以直接用于转化，或者-20℃保存备用。

6. 转化、挑克隆鉴定：
感受态细菌的转化效率必需至少在107以上，否则很难得到克隆。根据所使用的感受态细菌，加入尽量多的经过Dpn I消化后的突变产物用于转化。通常每100微升感受态细菌中可以加入5-10微升经过Dpn I消化后的突变产物。按照所使用的感受态细菌的操作方法进行操作，在涂板前通过离心浓缩的办法，把所有被转化后的细菌，全部涂布到含有适当抗生素的平板上，培养过夜。通常会得到50个以下的克隆。如果发现克隆有上千个，那么肯定是有什么地方出了问题。
对于得到的克隆，可以先挑克隆小抽酶切鉴定。以确认得到的质粒的大小和质粒中插入片断的大小与预期结果是否相符。
取3-5个酶切鉴定正确的克隆去测序，以最终确认得到的克隆是否是预期的突变克隆。通常大约每2个克隆中会得到一个预期的突变克隆。但有时也可能会因为随机因素，会测序了3-5个克隆才得到一个预期的突变克隆。

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