Church缓冲液试剂盒

实验操作篇

，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

【求助】全基因组甲基化状态的实验方法

crazygreat 各位大侠，小弟现在做的实验需要进行全基因组甲基化状态的测定，有谁知道有没有这方面的试剂盒吗，或者大家都选择什么方法进行这种实验？ freecell 为了定量测定人基因组中的甲基化，哈佛大学的 George Church等，以及加州大学的Kun Zhang连同弗吉尼亚联邦大学的Yuan Gao等，将传统的甲基化工具如DNA的重亚硫酸盐转化与近期开发的目标基因组捕获技术和高通量测序相结合。

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器混匀一次。4°C ，3000 rpm 离心 5 分钟以沉淀细胞核。弃上清，并加入含有 DTT 的缓冲液 B 。这个时候你会发现细胞核不太容易重悬，最好用剪去前端部分的 1 ml 枪头吹打数次进行混匀。再次离心，弃上清，并将沉淀用 300 ul 含有 DTT 的缓冲液 B 再次重悬，并将实验组和对照组细胞核样品分别转移到一个新的 1.5 ml 离心管中。此时，我们已经为后续酶切提供了一个合适的缓冲液体系。虽然试剂盒推荐微球菌酶的一般起始量为 0.5 ul/每 4X 106 细胞，但因为我们仍然想优化