蛋白示踪上样缓冲液(非还原，5×)

特别提示：包括蛋白示踪上样缓冲液(非还原，5×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：蛋白示踪上样缓冲液(非还原，5×)
英文名称：The protein sample buffer

产品货号：蛋白示踪上样缓冲液(非还原，5×)
产品规格：5ml



除了蛋白示踪上样缓冲液(非还原，5×),，我公司还供应以下相关产品：



名称：组织线粒体纯化试剂盒
货号：YT044
规格：50-100次
本试剂盒用于快速便捷分离动物组织线粒体，在分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白，可用于研究细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放。

使用本试剂盒分离获得的线粒体纯度较高，并且绝大部分分离获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。因此本试剂盒分离得到的线粒体可以用于线粒体的生理功能等方面的研究。例如可以使用百奥莱博的YT148线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测定分离得到的线粒体的膜电位。

本试剂盒分离得到的线粒体也可以被试剂盒中的线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。提供了两种不同的线粒体分离试剂，适用于不同的组织样品。本试剂盒提供了用于组织消化的胰酶消化液，使对组织样品的处理更加便捷。如果每个组织样品的重量为50-100mg，本试剂盒可以处理50-100个样品。

试剂盒组份：
线粒体分离试剂A————60ml
线粒体分离试剂B————60ml
胰酶消化液——————50ml
线粒体储存液—————3ml
线粒体裂解液—————15ml

注意事项：
1. 试剂盒中的试剂对于不同的实验目的不必全部使用。
2. 如果用于制备蛋白样品，需自备PMSF，否则不必使用PMSF。PMSF(YT615)可以向百奥莱博订购。PMSF一定要在线粒体分离试剂或线粒体裂解液加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
3. 使用说明中的操作步骤按照组织重量为50-100mg进行说明，如果组织块较大，可以按比例加大各溶液的使用量。
4. 分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷。
5. 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11,000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。

储存条件：-20℃，有效期一年。


名称：超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)
货号：RFT047
规格：10T(50μl)
本产品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD-45kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用说明：
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品每次使用前，要95℃加热处理5分钟。

一. 制胶：
I 配制分离胶
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4．静置5-10分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)

	分离胶	浓缩胶
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×多肽电泳凝胶缓冲液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(电泳级)	1.8 ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫酸*(代"铵")和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4．静置20-30分钟装待凝胶聚合

二. 电泳：
1. 取一管分装好的Marker样品，彻底融化，95℃加热处理5分钟，充分混匀后备用。
2. 电泳前，将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔，根据表二条件进行电泳，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件

恒电压	150 V
起始电流	45-55 mA
结束电流	10-15 mA
电泳时间	2-3小时

三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。

储存条件：-20℃，有效期12个月。