福尔马林-EDTA脱钙液试剂盒

不同样本破碎和匀浆中常见问题及解决方案

样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂，使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆，加入裂解液若粘稠至不能有效分层，可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit（货号：74104）提取时，可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%，能够有效改善结果。   血液样本 提取得到的 RNA 量少；由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差，有降解；污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA，以及天然酶抑制剂影响下游 RNA

TSA多重免疫荧光染色的实验步骤

实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原

免疫组化技术规范

组化染色常不能到达理想结果或不成功。组织同样不能长时间放置在70%的乙醇中，酒精固定后的组织形态不如福尔马林固定的组织。脱钙液对抗原破坏较为严重，因此在组织脱钙前最好在福尔马林液中固定48小时，若组织没有固定透则酸会破坏抗原，脱钙液中酸的浓度与脱钙时间都必须尽量控制在最低的限度。3、浸蜡：我们认为浸蜡温度应控制在58~60℃左右，浸蜡用的石蜡应经常更换，以减少石蜡中二甲苯的含量。高温下的二甲苯容易使组织发脆，细胞收缩，更容易掉片。4、切片厚度：用于免疫组织化学染色的切片厚度为3-4微米。为防止在染色过程