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特性:一片既能抑制蛋白酶又能抑制磷酸酶,给磷酸化蛋白最全呵护!
| 蛋白酶和磷酸酶复合型抑制剂片剂成分 | 靶点(机制) |
| 抑肽酶 | 丝氨酸蛋白酶(不可逆) |
| 乌苯美司 | 氨肽酶(可逆) |
| E-64 | 半胱氨酸(不可逆) |
| 亮肽素 | 丝氨酸与半胱氨酸蛋白酶 (可逆) |
| EDTA† | 金属蛋白酶 |
| 氟化钠 | 丝氨酸/苏氨酸以及酸性磷酸酶 |
| 原钒酸钠 | 酪氨酸以及碱性磷酸酶 |
| β-甘油磷酸盐 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 |
| 焦磷酸钠 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 |
†无EDTA配方中不含有此项
使用场合:进行磷酸化蛋白研究或者任何需要保存的蛋白溶液
规格:20片,每片处理10mL蛋白溶液或者抽提液
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文献和实验化状态进行有效保护。无数经验和实验证据表明:使用 western blot 检测磷酸化蛋白时,一定要在细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使出来条带也会很浅,给后继定量分析造成困难。磷酸酶抑制剂可以自己配制,也有商品化的 cocktail 可直接购买。像 erk1/2 的磷酸化有 THR 磷酸化和 tyr 磷酸化,所以要有 ser/thr 磷酸酶抑制剂和 tyr 磷酸酶的抑制剂。一般自己配制略显麻烦,考虑的因素比较多,效果不一定好,很多商品化的 cocktail 操作
检测蛋白磷酸化一定要加磷酸酶抑制剂!!除此以外还应该加蛋白酶抑制剂。 http://www.millipore.com/techpublications/tech1/mcproto402 Protease Inhibitors · EDTA: 1 mM · PMSF: 1 mM · Aprotinin, leupeptin, pepstatin: 1 µg/ml each Phosphatase Inhibitors ·
bigrabbit wrote: 这是本人所用的核蛋白提取方法,简单方便,提出的核蛋白我用来作EMSA, 检测蛋白核转移,从来没有问题。 Thanks! andy-h 我用碧云天的试剂盒提也没问题,重要的两点是 细胞种密一点,然后蛋白酶抑制剂用cocktail 397740085 请问,上海生工的胞浆胞核蛋白提取盒,在提取组织蛋白时,是怎么提的,步骤4时需要估计紧密细胞的体积
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