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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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—20℃
特别提示:包括丁酸*溶液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:丁酸*溶液
产品规格:100ml
用途:增加含病毒启动子的转染基因的表达(抑制组*酸脱乙酰),阻断DNA合成。
注意事项:主要由丁酸*、去离子水组成,工作浓度常为2-5mmol/L
保存:—20℃,12个月
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文献和实验蒸馏水将之溶解后,定容至100ml。 (2)0.1mol/L正丁酸溶液:称取13g碘和约40g碘化钾,放置于研钵中。加入少量蒸馏水后,将之研磨至溶解。用蒸馏水定容到1000ml,在棕色瓶中保存。此时可用标准硫代硫酸钠溶液标定其浓度。 (3)0.5mol/L正丁酸:取0.05ml正丁酸,用0.5mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解即成。 (4)0.1mol/L碘酸钾(KIO3)溶液:称取0.8918g干燥的碘酸钾,用少量蒸馏水将之溶解,最后定容至250ml (5)0.1mol
c,用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d,PBS清洗 10minX2 e,用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f,PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul),37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端
[实验原理] 总RNA,经寡聚(d丁)纤维素亲和层析柱分离出mRNA,以寡聚(d丁)为引物,经反转录合成双链cDNA。先用反转录酶合成第一条cDNA链;经碱降解作用除去RNA模板后用大肠杆菌DNA聚合酶,以第一条链cDNA的3’末端结构为引物合成第二链,最后形成双链cDNA。 [仪器、材料与试剂] (一)仪器和材料 紫外线透射仪、移液枪、琼脂糖凝胶电泳系统 (二)试剂 特异引物、逆转录试剂盒 [实验步骤] (一)cDNA的合成 1、取约9uL mRNA,依次
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