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469
- 英文名:
YT Taq DNA Polymerase
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别提示:包括YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)
英文名称:YT Taq DNA Polymerase
产品规格:200U|1000U
YT Taq DNA Polymerase简称YT Taq酶,是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶,是我司优先推荐的基因PCR克隆用酶。
YT Taq 酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外,YT Taq 酶有5’至3’外切酶活性,但YT Taq 酶没有反转录酶活性。
由于YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为1.6×10-6,略低于Pfu酶的2.6×10e-6
。
YT Taq 酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶,和Taq酶的扩增效率比较接近。因此YT Taq 酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
1)用YT Taq 酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs,可以用于基于T载体的PCR片断克隆。
2)YT Taq 酶可以扩增长度达5kb的DNA片断,最长可以扩增长达10kb的DNA片断。通常适合扩增3kb以下的DNA片断。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10×YT Taq Buffer (with Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20mM MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。
失活或抑制:酚*仿抽提可以使YT Taq 酶失活。
储存条件:-20℃
注意事项:
1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用YT Taq 酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2)YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此YT Taq 酶一定要最后加入,并且要在冰浴上操作。
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文献和实验of a master mix containing water, buffer, dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase in a single tube, which can then be aliquoted into individual tubes. MgCl2 and template DNA solutions are then added. This method of setting reactions minimizes the possibility
Fast Taq DNA Polymerase都能做到!产品特点:1. 超快速DNA合成(10-15 s/kb)。2. 大幅度提高保真性,约为Taq 酶的3倍,接近Pyrococcus furiosus DNA聚合酶(Pfu)的水平。3. 高退火温度。在比Tm值高3 °C的条件下,引物仍能有效与模板配对结合,有效打开二级结构,避免引物二聚体的形成,提高扩增特异性和效率。4. 能够从含抑制剂较多的模板直接扩增。5. PCR 产物3’末端有一个“A”碱基,可以直接用于T-载体连接克隆
物,也不用担心抑制不稳定,使用起来方便、高效。此外,由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液,缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用,一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl,QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。 此外,热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒,在RT反应较低温度下,Taq酶没有活性,逆转录酶发挥活性;RT反应结束,高温灭活逆转
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