- ￥109 - 201
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC5588
- 国内
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Taq DNA Polymerase(含预混Mg2+的10 × Taq Buffer)
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
250 U, 2.5 U/ul / 500 U, 2.5 U/ul
| 规格： | 250 U, 2.5 U/ul | 产品价格： | ￥109.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500 U, 2.5 U/ul | 产品价格： | ￥201.0 |
Taq DNA Polymerase(含预混Mg2 +的10×Taq Buffer)
产品特点
Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD。Taq DNA Polymerase 具有5-3’DNA聚合酶活性和 5-3’外切核酸酶活性，无 3-5’外切酶活性。在 PCR 反应中，Taq DNAPolymerase延伸速度为 1-2 kb/分钟，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。
成分规格
|
产品组成 |
规格 |
|
Taq DNA Polymerase |
250Ｕ/ 2.5U/μl |
|
10 × Taq Buffer（含 Mg2+） |
1m / 2*1 ml |
|
-20℃，有效期 1 年 | |
|
本产品仅供科研使用，不得用于其它用途 | |
使使用方法
（注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、
引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR 体系：
推荐体系(50 μl)
|
试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
10 × Taq PCR Buffer |
5μl |
|
dNTP Mixture(2.5 mM each) |
4μl |
|
Primer 1 (10 μM) |
2μl |
|
Primer 2 (10 μM) |
2μl |
|
Taq DNA Polymerase (2.5 U/μl) |
0.5 ~ 1μl |
|
ddH2O |
Up to 50μl |
注 意：
A .引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
B. 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）
2. PCR 程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
94℃ |
5min | |
|
25－35cycles |
变性 |
94℃ |
30sec |
|
退火 |
55－65℃ |
30sec | |
|
延伸 |
72℃ |
1kb/30sec | |
|
终延伸 |
72℃ |
5min | |
注 意：
a. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
b. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。
C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3. 结果检测：
反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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