Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)试剂盒

特别提示：包括Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)
英文名称：Taq DNA Polymerase
产品规格：200U|1000U|5000U

Taq DNA聚合酶简称Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶，95℃孵育时的半衰期大于40分钟。Taq酶的分子量为94 kDa。Taq酶可以催化5"至3"方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3"至5"的外切酶活性，有非常低的5"至3"外切酶活性。由于Taq酶没有3"至5"的外切酶活性，因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用，最终会导致PCR产物的3"末端会产生3"-dA overhangs，即产生带一个A的3"粘端。

来源：本Taq DNA Polymerase为recombinant Taq DNA Polymerase，通过大肠杆菌表达纯化获得，和纯化获得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性质相同。

功能：
1）本Taq酶可以扩增长度达5 kb的DNA片段，最长可以扩增长达8kb的DNA片段。通常适合扩增3kb以下的DNA片段。
2）用本Taq酶扩增产生的PCR产物带有3"-dA overhangs，可以用于基于T载体的PCR片段克隆。
3）PCR反应过程中可以掺入生物素、Digoxin或一些荧光机团标记的脱氧核苷酸，即可以用核酸的标记反应。
4）本Taq酶除用于各种PCR扩增以及DNA标记外，还可以用于DNA测序。

活性定义：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]dTTP。

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。

10×PCR Buffer (with Mg2+)：100 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl2, 0.8% (v/v) Nonidet P40。

失活或抑制：酚*仿抽提可以使Taq酶失活，加入脱氧胆酸*至0.06%，SDS至0.01%，或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq酶。

本产品用于50微升的PCR反应体系，足够用于160个反应；用于20微升的PCR反应体系，足够用于400个反应。

储存条件：-20℃。

注意事项：
由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5，对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶，例如Pfu DNA polymerase。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测，Taq DNA polymerase是最佳选择。