- ￥1510
- 经科
- JK-052
- 国产
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
1ml
-
产品介绍
本公司生产的siRNA专用转染试剂是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂，它具有较强的压缩RNA的能力，能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中，而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比，具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
该转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。
使用方法
siRNA转染
以24孔板为例，请参考下表的转染规模调整，步骤如下:
1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞，细胞培养12-24小时，使转染时细胞密度达到60-70%融合度。
2、siRNA稀释: 将15pmol的siRNA加入Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL。
3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL。
4、复合物制备：将上述siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合，轻轻吹打均匀后，室温静置10分钟。
5、将上述20µL复合物加入到24孔板中，轻轻吹打混匀，继续培养18-48小时后检测转染效率，无需更换
培养基。
siRNA转染的优化
可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上，转染试剂 (µL):siRNA (pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
不同培养板所需转染试剂和siRNA的用量
培养板
单孔面积
接种培养基
Opti-MEM稀释后终体积
siRNA转染
试剂用量
siRNA
96孔板
0.3cm2
200µL
10µL
0.4µL
7.5pmol
24孔板
2cm2
500µL
20µL
1µL
15pmol
12孔板
4cm2
1mL
40µL
2µL
30pmol
6孔板
10cm2
2mL
100µL
4µL
60pmol
60mm培养皿
20cm2
5mL
200µL
8µL
120pmol
100mm培养皿
60cm2
15mL
600µL
24µL
360pmol
运输保存
常温运输，2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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docado 我要做乳腺癌细胞siRNA瞬时转染，不知道哪里的转染试剂比较好用、可靠。 Invitrogen公司的脂质体LipofectamineTM-2000 德国QIAGEN公司Attractene Transfection Reagent 北京英恩格公司的EntransterTM -R 这些是否有人用过，转染
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种，这些方法各个实验室都有用过，但最常用的是使用转染试剂，这些转染试剂有的是阳离子脂质体，有的则不是。下文除了介绍各种转染方法外，在文章末尾还列出了常用的RNAi转染试剂。 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒
50 代以内的细胞。50 代以后的细胞不建议采用，因为转染效率会随时间的推移而下降。 6.避免使用抗生素 从铺盘直到转染后 72 小时内，应避免使用抗生素。在转染的细胞中，已经显示出抗生素积累到了毒性水平。为获得最佳的siRNA输送效果，某些细胞和转染试剂需要无血清的条件。我们建议在正常的生长培养基和无血清培养基中均做转染试验，以确定每个转染实验的最佳条件。 7.使用优化的试剂转染 siRNA 请使用您的细胞类型适用的最佳 siRNA 转染试剂和试验方案。对于 siRNA 试验，转染试剂的选择
技术资料