碱性磷酸酶 (AP)-Alkaline Phosphatas

碱性磷酸酶 (AP)

Alkaline Phosphatase (AP)

grade I, from calf intestine

General description

碱性磷酸酶催化从磷酸化的各种化合物中除去磷酸基团。它水解 DNA 和 RNA 中的 5′-单磷酸酯基团。 它还可以从 RNA 中水解 5′-二磷酸和 5′-三磷酸基团。

Specificity

热失活：AP 活性通过在 65°C 温育被不可逆转地破坏。
去饱和取决于蛋白质浓度 - 使用低于 10 U/ml（0.1 mol/l 甘氨酸缓冲液，pH 10.5，1 mmol/l MgCl₂ 和 0.1 mmol ZnCl₂） ，AP 在 65℃ 孵育 10 分钟后失活。

Application

从寡核苷酸和蛋白质核苷酸交换和释放中选择性切割末端磷酸基团。 它还用于磷酸化样品，以区分磷酸酯部分（以磷酸化聚糖形式存在）和磷酸化氨基酸残基。

Quality

污染物： PDE <0.0004%，ADA 和 A-5-MP 脱氨酶 <0.004%

Sequence

AP 是相同或几乎相同的亚基的二聚体；每一个都包含 2 个 Zn²⁺ 分子，一个紧密结合，且是结构稳定所必需的，另一个是松散结合的，且是催化活性所必需的。活性位点含有反应性丝氨酸。
在一些哺乳动物（例如人）中，至少存在 3 种可区分的同工酶：肠、胎盘，以及在骨/肝/肾中发现的形式。
 

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