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- CM-1296H1
- 上海
- 2026年08月02日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 供应商：
上海淳麦
- 检测范围：
详见产品标签
- 检测方法：
ELISA
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP
- 样本：
细胞培养上清、血清、血浆、尿液、组织样本等
- 规格：
48T/96T
人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒
人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒是本公司自主研发的高灵敏度酶联免疫检测试剂盒，专门用于定量检测人样本中的末端脱氧核苷酸转移酶含量。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，具有灵敏度高、特异性好、重复性优等特点，广泛应用于末端脱氧核苷酸转移酶相关的基础医学研究、药物开发及临床检测等领域。产品参数
| 产品名称 | 人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒 |
| 检测物种 | 人(Human) |
| 检测靶标 | 末端脱氧核苷酸转移酶/TdT |
| 检测方法 | 双抗体夹心ELISA法 |
| 标记物 | HRP |
| 检测范围 | 详见产品标签 |
| 灵敏度 | 高灵敏度 |
| 样本类型 | 细胞培养上清、血清、血浆、尿液、组织样本等 |
| 保存条件 | 2-8℃避光保存 |
| 有效期 | 6个月 |
检测原理
人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测人样本中的末端脱氧核苷酸转移酶含量。微孔板预包被抗人末端脱氧核苷酸转移酶捕获抗体，加入标准品或样本后，末端脱氧核苷酸转移酶与捕获抗体结合；再加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-末端脱氧核苷酸转移酶-酶标抗体复合物；加入TMB底物显色，终止反应后测定吸光度值。吸光度值与样本中末端脱氧核苷酸转移酶浓度呈正相关，通过标准曲线计算待测样本中人末端脱氧核苷酸转移酶的含量。操作步骤
1. 准备：将人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒各组分恢复至室温(18-25℃)，按需配制洗涤液工作液。2. 加样：分别在标准品孔和样本孔中加入100μL标准品或待测样本，37℃孵育90分钟。
3. 洗板：甩去孔内液体，每孔加入洗涤液，静置后甩去，重复5次。
4. 加检测抗体：每孔加入100μL HRP标记检测抗体工作液，37℃孵育60分钟。
5. 洗板：重复洗涤5次。
6. 显色：每孔加入TMB底物溶液100μL，37℃避光孵育15-20分钟。
7. 终止：每孔加入终止液50μL，轻轻混匀。
8. 测定：在450nm波长下测定各孔吸光度值(OD值)。
样本制备
血清样本：采集人全血，室温静置30分钟后3000rpm离心10分钟，取上清液检测。血浆样本：使用EDTA抗凝采血管采集人全血，3000rpm离心10分钟，取上清液。
组织匀浆样本：取人组织加入PBS匀浆，4℃离心取上清液检测。
细胞上清液：收集细胞培养上清液，离心去除细胞碎片后取上清检测。
样本若不及时检测，请分装后-20℃冻存，避免反复冻融。
保存条件
人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒请在2-8℃避光条件下保存，有效期6个月。请勿冷冻保存，使用后请及时将剩余试剂放回2-8℃。TMB底物溶液请避光保存，显色反应需在暗处进行。应用领域
人末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒广泛应用于以下研究领域：末端脱氧核苷酸转移酶相关的基础医学研究、免疫学检测、生物标志物研究、药物靶点研究等。关键词
末端脱氧核苷酸转移酶ELISA试剂盒、人末端脱氧核苷酸转移酶 ELISA试剂盒、Human TdT ELISA Kit、末端脱氧核苷酸转移酶检测试剂盒、末端脱氧核苷酸转移酶定量检测、人末端脱氧核苷酸转移酶检测、TdT ELISA、末端脱氧核苷酸转移酶免疫检测、末端脱氧核苷酸转移酶含量测定、CMBIO、淳麦生物
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文献和实验（一）原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点（缺口），暴露出大量3- 羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT ）将标记的dUTP 进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 （二）荧光标记法 1 ．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活，将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断，产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性，将外源性核苷酸和酶（末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）和DNA聚合酶I或Klenow大片段）渗入到凋亡细胞中，催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合，并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后，将自身染色体或DNA切割，产生与DNA断裂数目相同
置于湿盒中）；同时设立对照： A）阴性对照：每一实验均应设立对照，每孔加50μl标记液（无末端转移酶）代替TUNEL反应混合物； B）阳性对照：每一实验均应设立对照，用微球核酸酶或DNA酶I处理已固定/透化的细胞（1μg～1mg/ml，室温10min），以诱导DNA链断裂。37℃孵育 30min； PBS洗3次； 单个转换和分析：标本吹干，加50μl转换POD（注意要在单层细胞上均匀分布POD，为避免蒸发，将玻片置于湿盒中）37℃ 30min，PBS洗3次，加50～100μl
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