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- XY-Bioscience
- XY179E
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
DAB HRP Assay Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃避光保存一年
- 规格：
4.5 ml
【产品概述】
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP)，用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western blot、Southern blot、Northern blot、EMSA等膜显色的试剂盒。DAB（3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride）是HRP的常用反应底物。在HRP的催化下，DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。因此在DAB显色后，还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。本试剂盒既可以用于Western blot等结合有HRP的膜的显色检测，同时也适用于免疫组化或原位杂交实验中，结合HRP的细胞或组织显色，以及细胞或组织内源性的HRP显色。本试剂盒操作简单快捷，实验结果可用肉眼直接观察，非常适合不具备暗室或特殊成像设备的实验室使用。DAB 溶液为强致癌物，使用时请注意防护，开盖前需离心,避免沾染。
【产品组成】 DAB Reagent A 4.5 ml
DAB Reagent B 1 ml
【保存条件】
-20℃避光保存一年
【常见问题及解决方案】
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文献和实验底物范围较广，包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB，0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3％ (W
化物酶，然后用PBS洗涤三次，每次 5min。4 ） 加入一抗（用3%BSA-PBS封闭液1:50稀释一抗），37℃湿盒孵育1h。5 ） 加入Post-blocking室温湿盒孵育30min,然后用PBS洗涤三次，每次5min。6 ） 加入稀释好的辣根过氧化物酶（HRP）标二抗，室温下湿盒孵育30min。7 ） 用PBS洗涤玻片5次，每次5min。8 ） 按照DAB试剂盒说明添加显色液，避光显色30s-5min。用蒸馏水终止显色反应。9 ） 苏木精进行复染色3min,用蒸馏水冲洗。10
2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到最佳结果。 注意：荧光在一段时间后会越来越弱。 2.DAB显色 DAB（3,3二氨基联苯胺）和HRP反应产生棕色的不溶终产物。这种棕色沉淀不溶于酒精和其它有机溶剂，对于必需使用传统复染和封固介质的免疫组化染色应用特别理想。 对于AP标记的二抗我们选用BCIP
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