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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
EZ-T Simple Zero pTOPO Cloning Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
−20℃恒温保存一年
- 规格：
20 rxn
【产品概述】
本产品不同于使用T4 DNA 连接酶的传统克隆方法，而是采用拓扑异构酶Ⅰ（TopoisomeraseⅠ），可短时间内（几秒钟-几分钟）高效连接DNA片段。连接产物转化大肠杆菌时，无需冰浴和热激，室温5分钟内完成转化，转化后大肠杆菌37℃复苏10分钟即可涂板。有效连接片段可长达10 kb。此外，本产品无自连、零背景，无需蓝白斑筛选，阳性克隆比例很高，极少出现空载体，是简单、快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。
本产品在克隆插入位点两侧不含多克隆酶切位点，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行酶切时，与含多克隆位点的T载体不同，酶切反应将不受T载体上其它酶切位点上的影响，增加了成功率。
测序可以采用M13F/M13R通用引物测序（见下页质粒图谱）。
pTOPO-T Simple载体图谱：
pTOPO-T Simple载体通用测序引物序列： M13F: TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R: CAGGAAACAGCTATGACC
pTOPO-T Simple载体多克隆位点序列：
【产品组分】
| pTOPO-T Simple Vector（30 ng/μl） | 20 μl |
| 1kb Control（30 ng/μl） | 5 μl |
| 10 x Enhancer | 20 μ |
【保存、运输条件】
−20℃恒温保存一年
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