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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2×ExPfu PCR StarMix Loading Dye free
- 保质期:
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
一年
- 规格:
1 ml/1 ml x 5/1 ml x 10
【产品概述】
2 x ExPfu PCR StarMix为预混的含有优化浓度的ExPfu高保真DNA Polymerase、 dNTPs、 Mg2+、高保真反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、 SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染机率。 PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。 ExPfu高保真DNA聚合酶是一种基于Pfu改造的混合酶,具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的错配碱基。其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase 的35倍,反应速度视模板复杂程度约为2-4kb/min。对于一般性模板可以保证10kb的扩增长度。
【用途】
• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等。
【产品组分】
| 2 × ExPfu PCR Mix | 1 ml |
| ddH2O | 1 ml |
【保存条件】
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
【质量控制】• 以λ DNA为模板,可以有效扩增10 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染【注意事项】
ExPfu扩增后的PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化处理的平末端目标载体连接,也可先连接到线性平末端克隆载
体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation Kit, Cat. No. T170-01),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应
先纯化,再在PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T™ A-Tailing Kit( Cat. No. T173-01)进行。
【相关产品】
| 产品 | 货号 | 规格 | 页码 |
| ExPfu DNA Polymerase | XY161-01 | 150 U | 034 |
| XY161-05 | 150 U | 034 | |
| XY161-10 | 150 U | 034 |
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文献和实验Cyanine Dye Purification Protocol
. 12 mL syringe (1 per dye) Pre-load protocol: Wash Sep-Pak with 10 mL of acetonitrile. Wash with 5 mL of water. Wash with 10 mL of 15 mM TEAA. Sample Preparation, Loading, and Elution: The column
Real-Time PCR: the TaqMan Method
aquaticus, a thermophile whose polymerase is able to withstand extremely high temperatures), free nucleotides (dNTPs for DNA, NTPs for RNA), and buffer. This movie shows PCR in action. The temperature is then alternated between hot and cold to denature
-stop PCR only; see Steps 1-22)SSCP loading dye (for SSCP only; see Steps 23-37)95% (v/v) formamide10 mM NaOH0.25% (w/v) bromophenol blue0.25% (w/v) xylene cyanolTaq DNA polymerase (5 U/µl)TBE Buffer (1X and 5X)Prepare a 5x stock solution in 1 liter
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