- ￥2500 - 8800
- glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase原核表达，哺乳动物细胞表达
- 2025年12月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
重组蛋白表达
- 提供商：
福因德科技（武汉）有限公司
可以根据客户需求：选择不同的标签蛋白、抗性、表达元件和表达宿主。
原核表达特色：
- 蛋白可溶性表达;
- 活性蛋白表达;
- 用于蛋白质互作研究的蛋白表达;
- 蛋白质成功复性;
- 原核表达优势：
- 根据客户序列信息，Frdbio进行基因优化分析：mRNA、密码子偏爱性等多维度优化。2. 多种表达载体和宿主菌供选择。
| 服务内容 | 价格 | 周期 | 交付标准 | 备注 | |
| 基因优化合成 | 市场优惠时价 | 含合成基因质粒和克隆菌 | |||
| 蛋白表达 | *验证测试 | 500元 | 5个工作日 | 含目的基因的表达质粒+克隆菌株+表达菌株 | |
| *表达保证型 | 2000元 | 10个工作日 | 不成功不收费 | ||
| *上清保证型 | 4500元 | 15个工作日 | |||
| 蛋白纯化 | 1-3mg蛋白，纯度>85% | 根据蛋白难度协商定价 | 5个工作日 | ||
| 3-5mg蛋白，纯度>85% | 5个工作日 | ||||
| 5-10mg蛋白，纯度>85% | 10个工作日 | ||||
表达保证型：由Frdbio设计表达方案，表达目的蛋白的全长或者部分片段；
上清保证型：由Frdbio设计表达方案，表达目的蛋白的全长或者部分片段，并且保证其表达状态为上清可溶。
哺乳动物细胞蛋白表达
Frdbio配套的cDNA基因文库、自主知识产权的pFrd系列载体以及医药研发级别的工程细胞系，提高蛋白表达的成功率和产量。Frdbio可提供瞬转HEK293细胞和稳转CHO细胞系
| 服务名称 | 服务内容 | 周期 |
| 表达系统选择 | 自主知识产权的优化表达载体Frdbio系列，自主驯化高表达量293和CHO细胞 | |
| 表达载体构建 | 基因优化及合成，亚克隆到真核表达载体无内毒素质粒抽提。 | 2-4周 |
| 瞬转小试 | 细胞顺转，表达小试，表达分析鉴定 | 2-3周 |
| 表达纯化 | 表达条件优化、SDS-PAGE/WB分析鉴定、最优条件80ml扩大及纯化测试、标签去除测试（可选）。 | 2-4周 |
| 大规模发酵与纯化 | 无内毒素质粒大提、质粒质控及瞬时转染、蛋白亲和纯化（或其他纯化方式）、蛋白buffer置换浓缩、蛋白SDS-PAGE/WB 鉴定、MS鉴定（可选）。 |
*不同蛋白表达差异较大，我们尽可能在小试阶段尽可能多提供蛋白以满足您的蛋白需求。
*正我们使用标签（His,HA,cMyc）特异性抗体检测蛋白是否表达;
*如果选择不带标签表达，后期纯化费用会非常高,且需要提供蛋白特异性抗体用于检测蛋白。
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文献和实验在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计，实验和分析siRNA效应
而介导基因沉默。 实验范例 实验说明： 选择哺乳动物细胞中的3个基因：GAPDH, c-myc, 和一个RNA结合蛋白基因La作为研究的目标靶。相应的mRNAs序列进行分析来确定siRNA设计方案，进行siRNA制备，选择合适方法检测基因抑制的效果。根据基因的不同区域，每个基因分别设计4组不同的siRNAs。分别转染Hela细胞并检测目标靶基因表达抑制的程度。siRNA介导的基因表达抑制的程度分别通过mRNA和蛋白表达水平来检测。 超过一半以上的siRNAs对目的基因的抑制
lixingliang1987 我的实验流程是：先扩增带有Flag标签的基因，再转进293T细胞进行表达，然后做western验证蛋白表达情况，但是发光后却出来好几条条带，十分困惑，请大家帮忙看看，图片附上。第一幅图是内参GAPDH，第二幅图是我的目的蛋白。 lixingliang1987 自己顶一下 BioGao 一抗孵育有问题吧。。。 本文
设计 1. 首先明确实验目的，为什么要做这个 WB 实验？要验证哪些问题？ 例如：是想验证目标蛋白的表达情况？还是要验证目标蛋白在细胞几个不同组分中表达差异？或者是进行蛋白定位、蛋白转运过程的研究？ 2. 明确好实验目的后，根据样品种类，目标蛋白表达量及细胞定位情况，确定蛋白提取方案。 例如： * 目标蛋白表达量正常，但小分子量蛋白或是膜蛋白这类目标蛋白很难提取，使用常用的 RIPA（Radio Immunoprecipitation Assay）裂解液进行提取时，容易丢失
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