重组蛋白与抗体制备实验宝典

本书由福因德生物技术团队编写，旨在与实验人员分享重组蛋白和抗体制备科研工作中实践经验。全书以实际操作经验为主，为了叙述方便，适当叙述一些浅显理论。我们将实验室的标准操作流程（SOP）分享给广大科研工作者，不管之前是否从事过此类工作，也不管是否有专业基础知识，翻开这本书按照SOP可以快速进入实验。SOP中所涉及的核心试剂与材料，由福因德生物自己研发生产，保证流程的稳定性和经济性。福因德生物所提供的试剂都是常年测试验证的，科研用户可以放心选购。
  为叙述方便，本书SOP中所用到的溶液在文中用黑体标注，其配方紧跟其后括号内详注。因此，在进行实验前应该先通读整个SOP，并预先配制/准备SOP中每一个溶液和材料，才能保证实验顺利进行。SOP中用特殊标记凸显的文字注释，一定要注意阅读，这些注意事项都是至关重要的。部分SOP后面附加了实验中可能遇到的问题及解决方案，这些都是科研工作者遇到最多的问题，所以特别列出来。如果在进行实验中还有文中没有列出的或者其他SOP进行中遇到的问题都可以联系我们福因德技术团队(tech@friendbio.com )。
     如果想要快速进入实验，请从每章内容里面的SOP开始，以节约您的时间。
     本书只是介绍抗体制备最基本的方法流程，要想成为抗体的专业技术人才，非要经过长期孜孜不倦地积累，以及完整的分子生物学和免疫学知识体系作为支撑。
     抗体制备绝非简单的一个动物免疫，还牵涉后期纯化和修饰，抗体纯化和修饰的成本要远远高于前期抗血清的制备，抗体制备其实是一个技术和艺术活，无论多么精雕细琢都不为过。
全书主要包括以下SOP
SOP01  动物组织及细胞mRNA的提取制备
SOP02  mRNA反转录/cDNA的合成
SOP03  酶切连接法构建载体
SOP04  Simpleclone重组酶法构建载体
SOP05  Ni-NTA层析柱亲和纯化6His标签融合蛋白
SOP06   谷胱甘肽亲和柱纯化谷胱甘肽还原酶（GST)标签融合蛋白
SOP07   GST融合蛋白标签柱上酶切
SOP08   包涵体蛋白纯化
SOP09    Ni-NTA Beads亲和层析纯化6His融合标签包涵体蛋白
SOP10   –SH介导多肽与载体偶联
SOP11   EDC或EDC/NHS介导多肽与载体偶联
SOP12   GA(Glutaraldehyde,戊二醛)介导多肽与载体偶联
SOP13   兔耳静脉取血方法
SOP14   大小鼠眼眶取血方法
SOP15   弗氏佐剂乳化免疫抗原
SOP16   兔注射免疫
SOP17   鸡的选择和免疫
SOP18   间接ELISA法检测抗血清效价
SOP19   兔颈动脉放血与血清分离
SOP20   琼脂扩散实验检测抗血清效价
SOP21   饲养细胞的制备
SOP22   单克隆抗体杂交瘤细胞融合
SOP23   杂交瘤融合细胞铺板培养
SOP24   杂交瘤细胞的亚克隆
SOP25   单克隆杂交瘤细胞株冻存
SOP25   单克隆杂交瘤细胞株细胞复苏
SOP27   小鼠腹水生产
SOP28   (NH₄)₂SO₄沉淀法纯化抗体
SOP29  辛酸-硫酸铵法纯化腹水中的抗体
SOP30   Protein A /Protein G/ Protein L亲和纯化抗体
SOP31   含氨基配体特异性亲和柱的制备
SOP32   含巯基抗原/多肽特异性亲和柱的制备
SOP33  水稀释法提纯IgY抗体
SOP34  抗体/蛋白的HRP标记（NaIO₄氧化法）
SOP35  抗体/蛋白的FITC标记
SOP36   抗体/蛋白的生物素（Biotin）标记