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580
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")2×Long Taq PCR MasterMix品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:2×Long Taq PCR MasterMix品牌
编号:RFT092
规格:500μl|5×500μl
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。用于短链和长链DNA扩增,特别适合于长片段DNA的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。
质量控制:经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 50μl反应体系 | 终浓度 | |
| 2×MasterMix | 25μl | 1× |
| 上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 模板 | ×μl | 10pg-1μg |
| 水 | 补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序:
三步法:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
两步法:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火和延伸 | 68℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
除2×Long Taq PCR MasterMix品牌外,我公司正在打折促销以下产品:
YT176 高尔基体红色荧光探针 Golgi Body Tracker Red
BTN91202 双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit
SV1642 ACP-Surface 启动试剂盒
SV0495 MslI限制性内切酶 MslI Restriction Endonuclease
WE0166 无内毒素质粒中提试剂盒 NoEndo Plasmid Midi Kit
BTN3073 一管式病毒RNA提取试剂盒 One-tube virus RNA extraction kit
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KFS113 茜素红染色液(ph4.2)
SY0340 40%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺,29:1 40% Acryl/Bis Solution, 29:1
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BTN61205 血清白蛋白清除剂 Serum Albumin Scavenger
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YT076 TMB显色液(ELISA HRP显色用) TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solution for ELISA
BTN130966 水饱和正丁醇 Water Saturated Butanol
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SV0208 BspDI限制性内切酶 BspDI Restriction Endonuclease
KFS355 ATP酶测试盒(组织及细胞膜不需高速离心)
SY0603 脂质体核酸转染试剂 Liposome nucleic acid transfection reagent
SV0782 XmaI限制性内切酶 XmaI Restriction Endonuclease
BTN120414 DNA拓扑异构酶 I DNA Topoisomerase I
2×Long Taq PCR MasterMix品牌关键词:百奥莱博,2×Long Taq PCR MasterMix,RFT092
RFT086 Western封闭液I(BSA)
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ALH381 加热型考马斯亮兰快速染色液 heating type of Coomassie brilliant blue fast staining solution
YT583 D-乙酰*基酸水解酶 N-Acyl-D-Amino-Acid Deacylase (Crude Enzyme)
WE0310 TBST(pH8.0,10×)
BTN60912 非酶RNA清除剂2.0 Non-enzymatic RNA scavenger 2.0
SV1341 T7 RNA 聚合酶
YT171 β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 In Situ β-galactosidase Staining Kit
KFS254 Hoechst 33342染色液
SY0494 细胞膜红色荧光探针 DiI
SV0480 MlyI限制性内切酶 MlyI Restriction Endonuclease
BTN111109 DOP-PCR试剂盒 Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
HR0433 Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 9 activity assay kit
SY0132 MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 MEF1 luciferase reporter plasmid
BTN60401 75%乙醇(RNase-Free)
BTN160686-25K SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒 SuperTOPO TA Cloning Kit
ALH034 植物RNA提取试剂盒 Plant RNA Extraction Kit
2×Long Taq PCR MasterMix品牌关键词:百奥莱博,2×Long Taq PCR MasterMix,RFT092
·Long Taq DNA聚合酶
编号:RFT098
英文名称:Long Taq DNA Polymerase
规格:500U|5×500U
本品是由pfu DNA 聚合酶和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成。两种酶协同作用实现了扩增效率、合成速度和延伸性能的完美统一,可以合成超长的DNA片段。当扩增具有复杂的二级结构(GC rich等)的模板或具有重复序列的模板时,使用GC buffer进行PCR扩增将非常有效。另外,此酶具有比Taq DNA聚合酶约5倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。
产品组分:
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl)————————100μl
2×GC buffer(含Mg2+)—————————————1ml
活性定义:1单位(U) Long Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法;
1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 成分 | 体积 | 终浓度 |
| Template | 0.1-1μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
| Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
| 2×GC buffer | 25μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
| Long Taq (5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
| ddH2O | up to 50μl | - |
2. 混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购2×Long Taq PCR MasterMix品牌。
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
fidelity of the Thermus aquaticus (Taq ) DNA polymerase (3 ), the most commonly used thermostable polymerase. It is believed that inadvertent nucleotide misincorporations during the PCR extension steps cause chain terminations (3 ). The Taq polymerase
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