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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Rapid DNA Ligation Kit
- 库存:
957
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
30次/100次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售DNA快速连接试剂盒厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:DNA快速连接试剂盒
英文名:Rapid DNA Ligation Kit
规格:30次/100次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
产品简介:
DNA连接反应通过T4连接酶催化双链DNA的3"-OH和5"-P形成磷酸二酯键而将DNA共价连接在一起。被连接的DNA末端可以是粘末端(例如限制性切割EcoR I产生的末端),也可以是平末端(限制性切割Sma I产生的末端)。
Pheiffer 等人发现PEG可以促进T4 DNA连接酶催化的连接反应[NAR ,11,7853-7871,1983],连接反应只需十分钟即可完成。本产品就是根据这一原理设计,其特点如下:
1.超快,整个连接反应只需要室温5分钟左右,反应液可以直接用于转化实验。
2.高效,溶液配方经过优化,每μg插入DNA连接转化得到的重组子可达107左右。
3.既可用于平末端连接,也可用于粘末端连接,包括PCR产物与T载体的连接。
4.简单,客户只需要提供载体和插入片段即可。
使用及效果:
在离心管中分别加入要克隆的DNA与载体DNA(其摩尔比最好在3-10之间),共4 μL,加入5 μL溶液A和1 μL溶液B,混匀后室温放置10分钟后即可直接转化。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
关键词:DNA快速连接试剂盒,BTN70602,Rapid DNA Ligation Kit
关于DNA快速连接试剂盒厂家现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| BTN91204 | 动植物膜蛋白微量制备试剂盒 |
| BTN130833 | LAMP可见光染料 |
| BTN130567 | β-Tubulin小鼠单抗 |
| BTN70904 | 酵母tRNA溶液 |
| BTN130640 | 核酸内切酶V |
| BTN130831 | 丝状真菌线粒体DNAOUT |
| BTN60105 | 加A试剂盒 |
| BTN131142 | 鲁米诺 |
| BTN131155 | 山羊抗小鼠IgG,荧光素555标记 |
| BTN100410 | 超快转染试剂盒 |
| BTN130920 | dITP溶液,100mM |
| BTN130864 | Hoechst 33258干粉 |
| BTN80803 | 柱式动物线粒体DNAOUT,PCR级 |
| BTN131230 | DNase I干粉 |
| BTN81201 | 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 |
| BTN101005 | 即用型易错PCR试剂盒 |
| BTN130928 | 红细胞裂解液C型(核酸纯化) |
| BTN120421 | T4 RNA连接酶 |
| BTN130675 | 核糖核酸酶HII |
| BTN131187 | Acryl DNA助沉剂 |
| BTN70909 | 绿如蓝染料,PCR级 |
| BTN100924 | 丽春红S染膜液 |
| BTN121001 | 液体样品DNAOUT |
| BTN131064 | 细胞表面蛋白分离试剂盒 |
| BTN120307 | SP6 RNA聚合酶 |
| BTN81026 | 一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法) |
| BTN51203 | 非酶RNA清除剂1.0 |
| BTN100213 | DNA嵌套缺失试剂盒 |
| BTN100929 | 细菌膜蛋白质微量提取试剂盒 |
| BTN60206 | 氨苄青霉素溶液 |
| BTN60210 | 硫酸链霉素溶液 |
| BTN100948 | 电泳级橙黄G溶液 |
| BTN130910 | Long-Taq DNA聚合酶 |
| BTN130628 | Lambda核酸外切酶 |
| BTN101106 | 沉淀型TMB显色试剂盒 |
| BTN80910 | X-Gal溶液 |
| BTN3100 | RNA长效保存液 |
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶,反应10分钟。平滑末端连接:在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时,或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外,NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1:在25°C条件下,用1 unit(1:400稀释后取1 µl)T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
4连接酶把PCR片断连接到T载体上,而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。Topoisomerase的用途一般使用在复制DNA前把超螺旋DNA切割使之解旋后,再连接成线性DNA。Topo TA克隆即使用Topoisomerase高效连接的特性把含3`A端的PCR扩增片断快速连接到3`T端载体上,整个反应只需五分钟!一般T4连接酶需过夜才能高效连接。Topo TA克隆系统提供Topoisomerase I载体,感受态细胞,SOC培养基等。1. Add 1ml of TOPO®
,能够以模版为准切掉错配的碱基,因而得到的PCR产物多数是平末端,不能用T载体克隆。通常需用目的载体多克隆位点上的平末端单酶切位点,单酶切得到平末端的线性片断,直接连接PCR产物。这类酶得到的产物通常不能用TA克隆试剂盒。目前也有商业化的平末端PCR产物克隆试剂盒,不过较少用。平末端的连接效率低,通常需要高浓度的连接酶,较长的连接时间,合适的片断:载体比例,有的时候还需要调整反应体系的ATP浓度或者增加聚乙二醇(PEG2000),以得到较高的连接效率。许多厂家都有推出快速连接试剂盒
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