北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)报价

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名称：北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)报价
编号：QN1155
规格：1盒
英文名：ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色，含有HRP标记抗小鼠/兔IgG二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

试剂盒组分：
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠/兔IgG二抗-————0.3ml，效价1:500～1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项：
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

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·DAPI溶液(即用型)
编号：QN1319
英文名称：DAPI solution(ready-to-use)
规格：10ml|50mL
本产品为DAPI水溶液，为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

CAS号：28718-90-3
分子式：C16H15N5·2HCl
分子量：350.25
纯度：≥90% (HPLC和 TLC)
储存条件：-20℃避光，有效期一年。

DAPI(4’,6-二脒基-2-*基吲哚二盐*(代"酸")盐)是一种能够与DNA中大部分A，T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。


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SY0430 X-press Tag多肽 X-press Tag Peptide
KFS191 Annexin V-APC/PI双染双染细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-APC/PI Apoptosis Detection Kit
RFT064 30％丙稀酰胺溶液(19:1) 30％ Acylamide Solution(19:1)
SV1149 HaeIII 甲基转移酶 HaeIII methyl transferase
BTN121102 柱式鼠尾DNA提取试剂盒 Rat tail DNA column extraction kit
WE0245 1kb DNA Ladder
YT477 N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) N-mCherry plasmid（with CMV promoter）
ALH164 λ噬菌体DNA提取试剂盒 Lambda phage genomic DNA Extraction Kit
BTN130559 大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 E.coli Rosetta-gami(DE3) Rosetta Competent Cell
YT257 STAT3凝胶迁移突变探针(10μM) STAT3 Mutation Probe For EMSA(10μM)
SY0172 HIF-1-GFP报告基因质粒 HIF-1 GFP Reporter Plasmid
HR0480 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 MTT cell proliferation and cytotoxicity assay kit
BTN120505 Dam甲基转移酶 Dam Methyltransferase
YT912 伊红染色液 Eosin Staining Solution
SY0535 胶原酶I型 Collagenase I
KFS294 H-89(PKA抑制剂)
SV0036 AleI限制性内切酶 AleI Restriction Endonuclease
SV1406 RNA 上样染料（2X）
BTN61201 电泳级耐热型SYBR染料 SuperSYBR Green
YT008 RNase A (100mg/ml) Ribonuclease A
SV0957 Klenow 片段（3"→5" exo-）
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·还原型谷胱甘肽
编号：QN0317
英文名称：L-Glutathione reduced
规格：5g|10g|100g|1kg
本品用作生化试剂，巯基酶(蛋白质)保护剂和解毒剂。

别名：L-谷胱苷肽 L-半胱*酰甘*酸
CAS号：70-18-8
分子式：C10H17N3O6S
分子量：307.32
储存条件：2～8℃
性状：白色结晶性粉末

·吐温-80
编号：QN0243
英文名称：Tween-80
规格：100ml|500mL
本品吐温80为非离子型亲水性表面活性剂。气相色谱固定柱(最高使用温度160℃，溶剂为*仿、二*甲*(代"烷")、甲醇)，分离分析脂肪酸酯、醇、酮和卤化物;扩散剂;湿润剂。


别名：吐温80;聚氧乙*(代"烯")山梨糖醇酐单油酸酯
CAS号：9005-65-6
储存条件：室温密封保存
性状：琥珀色油状液体。

吐温(或聚山梨酯)为非离子型表面活性剂，是山梨醇与不同高级脂肪酸所形成的酯。有异臭、微苦。一般呈淡黄色到琥珀色粘稠液体状，但因分子量差异而有所不同。酸碱度：约6-8(5%)
根据不同高级脂肪酸所形成的酯，吐温分20，40，60，80等多种，根据不同的需要来选用。常用的有吐温20(Tween-20)、吐温21((Tween -21)、吐温40((Tween -40)、吐温60((Tween -60)、吐温61(T(Tween -61)、吐温80(T(Tween 80)、吐温81(Tween -81)、吐温85((Tween -85) 。
吐温60是硬脂酸酯;吐温 80为油酸酯;吐温20为月桂酸酯，是聚氧乙*(代"烯")去水山梨醇单月桂酸酯和一部分聚氧乙*(代"烯")双去水山梨醇单月桂酸酯的混合物

主要应用为：
1. Tween 和同类型的Triton 100(聚乙二醇辛基*基醚)非离子型去污剂可以在生物学实验中乳化蛋白，不破坏蛋白的结构，可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。离子型去污剂如SDS则破坏蛋白的结构。
2. 在生物学实验中作封闭剂，封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标位、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。Tween-20有复性抗原的作用，可提高特异性的识别能力。在做western blot时，用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点，可以降低抗体的非特异性结合。最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 – 0.1%)稀溶液。
3.常作为水包油(O/W)型乳化剂，使其他物质均匀在溶液中分散，主要用于农药、食品、化妆品。相对来说，吐温20更温和一些，吐温80的乳化性更强一些。

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