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北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)价格

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  • 2025年07月13日
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      -20℃避光

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      一年

    • 英文名

      ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)

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      207

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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    名称:北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)价格
    规格:1盒
    编号:QN1155
    英文名:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
    本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠/兔IgG二抗。

    SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

    试剂盒组分:
    封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
    10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
    HRP标记小鼠/兔IgG二抗-————0.3ml,效价1:500~1000
    ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

    常规电泳转膜后:
    1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
    2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
    3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
    4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
    注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
    5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
    6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
    7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
    8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
    注意事项:
    1.请根据一抗来源选择试剂盒。
    2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
    条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
    3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

    储存条件:-20℃避光,有效期一年。

    欲了解更多北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)
    编号:QN1159
    英文名称:Western Blotting Mouse/Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
    规格:1盒
    本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色,含有抗小鼠/兔IgG酶标二抗。

    SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

    试剂盒组分:
    封闭试剂————————————30g
    10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
    酶标二抗————————————0.5ml,效价1:500~3000
    20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

    常规电泳转膜后:
    1) 清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
    2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜,封闭液内,摇床震动,室温封闭30min。用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
    3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
    4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
    5) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
    6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量,按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
    7) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次10min。
    8) 配制DAB 显色:根据用量,取TBS-T 4ml,加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul,混匀,加在膜正面,室温下显色。在目标条带显出后,而且背景未出时,放入水中终止显色。

    注意事项:
    1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
    2. western blotting DAB显色法操作简单,但其敏感性与ECL发光发有一定的差距,一般只适用于丰度较高的蛋白。
    3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱,可延长抗体孵育时间。
    4. 如果完全没有条带,请检查前期蛋白处理及实验过程, 如果确认无误,反复两次依旧无结果,请换用ECL发光法显色。
    5. TBS-T(0.01M)配制方法:称取NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用800ml 的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH 到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

    储存条件:-20℃避光,有效期一年。


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    ·尼龙膜N+(0.45um)
    编号:QN1172
    规格:15cm*20cm|30cm*3m
    本品用于Southern、Northern、Dot/Slot blotting等。

    ·盐*(代"酸")平阳霉素
    编号:QN0029
    英文名称:Bleocin
    规格:10mg|100mg|1g
    CAS:55658-47-4
    分子式:C57H89N19O21S2·HCl
    分子量:1477.04
    储存条件:RT

    ·β-甘油磷酸二*
    编号:QN0698
    英文名称:Glycero 2-phosphate disodiu*(代"m") salt
    规格:25g
    本品β-甘油磷酸二*的五水合物,常用作测定磷酸酶的试剂。

    CAS号:819-83-0
    分子式:C3H7Na2O6p.5H2O
    分子量:306.11
    纯度:≥97%
    性状:白色结晶或粉末,溶于水,不溶于乙醇
    储存条件:2~8℃

    ·羧甲基壳聚糖
    编号:QN0663
    英文名称:Carboxymethyl chitosan
    规格:10g
    本品常用作重金属螯合剂、缓释剂、植物生长剂等科研实验领域。

    CAS号:83512-85-0
    性状:羧基化度80%,粘度10mP

    ·维生素B5(D-泛酸*)
    编号:QN0119
    英文名称:Carboxymethyl chitosan
    规格:100g

    英文名称:D-Pantothenic acid hemicalcium salt;Vitamin B5
    CAS号:137-08-6
    分子式:C9H16NO5 ·1/2Ca
    分子量:238.27
    储存条件:RT
    纯度:≥98%
    性状:白色针状结晶或粉末
    别名:本多生酸*;维他命B5

    ·瑞舒伐他汀*
    编号:QN0768
    英文名称:Rosuvastatin calcium
    规格:1g
    瑞舒伐他汀是一种选择性HMG-CoA还原酶抑制剂。HMG-CoA还原酶抑制剂是转变3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A为甲戊酸盐—胆固醇的前体—的限速酶。

    别名:罗舒伐他汀
    CAS号:147098-20-2
    分子式:C44H54CaF2N6O12S2
    分子量:1001.14
    储存条件:-20℃

    ·胃蛋白酶抑制
    编号:QN0438
    英文名称:Pepstatin A
    规格:5mg
    本品酸性蛋白酶抑制剂,包括胃蛋白酶、血管紧张肽原酶和组织蛋白酶D以及很多其他蛋白酶,有效浓度为1μM。

    别名:抑肽素
    CAS号:26305-03-3
    分子式:C34H63N5O9
    分子量:685.89
    储存条件:4℃
    性状:白色粉末


    北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)价格关键词:ECL化学发光法检测试剂盒,ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit Ig,小鼠/兔IgG,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG),QN1155

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