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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
359
- 英文名:
CTP Solution,2.5mM
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")CTP溶液(2.5mM)价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:CTP溶液(2.5mM)价格
编号:BTN131219
规格:2mL
英文名:CTP Solution,2.5mM
品牌:百奥莱博
产地:北京
GTP分子式为C9H13N3O14P3Na3 ,分子量是549.1,消光系数为9.0×103M -1×cm-1(pH7.0),λmax为271nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
CTP溶液(2.5mM)价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·可调式易错PCR试剂盒
编号:BTN160903
英文名称:Controlled Error-prone PCR Kit
规格:100次
易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性,在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错PCR和常规PCR的比较如下:

产品特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,实验人员在一定范围内可以控制突变率,一轮PCR的突变率范围在2-8突变/1000bp,更高的突变率可以通过多轮PCR达到。
3.可用于连续易错PCR,只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
4.可以扩增的DNA片段更长,达到3kb,对于3kb以上的产物,建议分段扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR专用dNTP 2.0,10× | 300μl |
| 易错PCR Mix 2.0,10× | 300μl |
| 易错PCR专用MnCl2 | 300μl |
| 易错PCR专用dGTP | 300μl |
| 超纯水 | 1ml |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为一年。
使用方法:
1. 将模板DNA稀释到1ng/uL。将引物稀释到10uM。
注意:引物是决定易错PCR成败的关键因素,设计引物时要保证其Tm在70℃,长度在25-30nt之间,GC含量在45%-60%之间,3端GC含量低,并且没有发夹结构。
2. 根据每1000bp的预期突变数按下表确定易错PCR的反应条件中MnCl2和dGTP的用量。表中的A表示易错PCR专用的MnCl2,B表示易错PCR专用的dGTP:
| 预期突变数 | 2个 | 3个 | 4个 | 5个 | 6个 | 7个 | 8个 |
| A的用量(μl) | 0 | 1.0 | 2.5 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 |
| B的用量(μl) | 0 | 0 | 0 | 1.0 | 2.0 | 3.0 | 4.0 |
3.以30μL的标准PCR反应体系为例,如果反应体系不是30μL,各成分需要按等比例增加或减少。在一干净的PCR管中,加入下列成分
注意:可以先计算出超纯水的用量,优先加水
| 成分 | 用量 |
| 超纯水 | 根据第2步加 |
| 易错PCR Mix,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用dNTP,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用MnCl2 | 根据上步 |
| 易错PCR 专用dGTP | 根据上步 |
| 自备DNA模板(1ng/μl) | 1μl |
| 自备PCR引物(10μM each) | 1μl each |
| Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 1μl |
4. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件,一般可以先尝试下面的PCR条件(对1Kb长的模板而言):
| PCR前变性 | 94℃ 3分钟 |
| 易错PCR(循环30次) | 94℃ 1分钟 |
| 45℃ 1分钟 | |
| 72℃ 1分钟 |
注:易错PCR一般不需要热启动,也不需要在PCR结束后做延伸处理。长度每增
加1Kb,时间延长1分钟。易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率,进而决定每个PCR产物可能的突变位点数,所以所需循环数由客户根据需要改动。
5.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
6. 克隆片段进行功能筛选、或者克隆后进行测序分析突变率、或者用此轮PCR的产物为模板,进行下一轮的易错PCR。
疑难解答:
Q:现象:没有PCR产物。
A:可能原因:一是引物没有优化,可以重新设计引物;二是模板DNA太少,可以增加用量;三是模板不纯,最好先胶回收;四是溶解DNA的溶液中有EDTA,降低了PCR反应体系的Mg离子浓度,可以适当补加Mg离子。
Q:现象:太多的PCR条带或PCR条带模糊一片。
A:可能原因:一是PCR循环数太多;二是复性温度太低;三是延伸时间太长;四是引物没有优化,可以重新设计引物;五是PCR条件没优化,可以使用touch-down PCR;六是模板有其他DNA污染;七是DNA模板质量不高或者浓度太高。
Q:如果需要更高的突变率,如何办?
A:可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮易错PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板,否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板,但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。
CTP溶液(2.5mM)价格关键词:CTP Solution,2.5mM,CTP溶液,CTP溶液(2.5mM),BTN131219
·Denhardt溶液(同位素探针)
编号:BTN91104A
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·柱式血液DNA提取试剂盒
编号:BTN60306
英文名称:Blood DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。
产品特点:
1. DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2.产量高,一般为1-10μg/mL全血(对哺乳动物血液)。
3. 操作简单,整个过程约20分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
4. 用量广泛,每次可以处理少达20μl(对禽类动物血液),多达1mL的血液(对哺乳动物血液)。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 红细胞裂解液(A型) | 25ml |
| 溶液A | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.02-1mL新鲜或抗凝血液(冷冻血需先37℃水浴融化)中加入0.5mL红细胞裂解液(A型),吹打混匀。
a)哺乳动物,血液使用量以300μl以下为宜,使用量越大产量越高,但产率会降低。如果血液多于300μl,重复1-2步两次可以提高产率。
b)禽类动物,血液使用量以20μl以下为宜,可以从第3步做起。
2.室温12000~15000rpm离心5分钟,沉淀呈粉红色,小心倾去上清。
3. 再短暂离心半分钟,吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解,但一般可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入0.5mL溶液A(溶液A有少量晶体沉淀,用前需要摇晃均匀),用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞,释放DNA,所以吹打越充分越好。
5. 静置2分钟待溶液变清亮后,将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟,以使DNA与膜充分结合。
6. 12000rpm离心半分钟,DNA将吸附到膜上,弃收集管中的废液。
7. 加入0.7mL的通用洗柱液,12000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
8. 加入0.3mL的通用洗柱液,12000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
9. 12000rpm离心半分钟,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通用洗柱液,否则会影响后续反应。
10. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入适量50μl DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果会更好。
11. 12000rpm离心半分钟,离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。
CTP溶液(2.5mM)价格关键词:CTP Solution,2.5mM,CTP溶液,CTP溶液(2.5mM),BTN131219
·植物DNA提取试剂盒
编号:BTN3672
英文名称:Plant DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是根据经典的方法改良得到的专门用于提取新鲜或冷冻植物组织基因组DNA(包括叶绿体DNA和线粒体DNA)的试剂盒。
产品特点:
1. 操作快速,整个过程在30分钟内即可完成。
2. 纯度高,A260/A280在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。提取得到的DNA大小在30-50Kb 之间。
3.产率高,高于大多数同类产品(尤其是基于离心柱的提取产品)。
4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,RNase A溶液4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL 加入到10-15mL塑料离心管(常用于培养细菌用)中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.3g左右,剪成微小的碎片,转移到装有溶液A的离心管中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为其中的主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管中。注意:匀浆液较为粘稠,可将1mL 枪头剪去一截后用于转移匀浆液,不能吸取的植物碎片可倒入。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积 65℃预热的溶液B,颠倒数次混匀。由于溶液B比较粘稠,可以将1mL 枪头剪去一截再吸取。
5. 加入15μl的RNase A溶液(10mg/mL)。
6. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
7. 加入200μl自备*仿,震荡器上充分震荡混匀30秒。
8. 12000~15000g室温离心2分钟,此时两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
9. 加入1倍体积(约750μl)的自备的异丙醇到上清液中,盖紧盖子后用手上下颠倒30秒混匀。此时一般将有絮状DNA沉淀出现。
10. 12000~15000g室温离心3分钟。此时管底将有微小DNA沉淀,小心弃上清,注意不要丟弃DNA沉淀。
11.在离心管中加1mL 75%乙醇,短暂震荡,12000~15000g室温离心3分钟,弃上清。
12. 重复上述操作一次。
13. 短暂离心,小心吸弃残留的液体(此步不要省略,否则残留的液体含乙醇将会影响DNA电泳、酶切和PCR等反应),室温晾干。
14. 加入50-100μl自备的TE缓冲液充分溶解DNA沉淀。直接取5-10μl电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
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CTP [Na4 ] 571.1 280 13.0x103 GTP [Na4 ] 611.1 252 13.7x103 UTP [Na4 ] 572.1 262 10.2x103 Concentration: c[M]=Amax /E; Amax = maximum of absorption. EDTA C10 H14 O8 N2 Na2 x2H2 O; Mw=372.3g/M
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