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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
CTP Solution,2.5mM
- 库存:
564
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应CTP溶液(2.5mM)促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:CTP溶液(2.5mM)促销
英文名:CTP Solution,2.5mM
编号:BTN131219
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
GTP分子式为C9H13N3O14P3Na3 ,分子量是549.1,消光系数为9.0×103M -1×cm-1(pH7.0),λmax为271nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
欲咨询购买CTP溶液(2.5mM)促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·植物DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号:BTN130939
英文名称:Plant DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
·RNase抑制剂(人源)(40U/μL)
编号:BTN3290
英文名称:RNase Inhibitor From Human
规格:2500U
本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor,其分子量为50 KD,能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性,Ki为3*10-14M,该反应是可逆的,通过尿素及硫基类试剂能够解离复合体,使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。
产品特点:
1. 抑制范围广,可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性,但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2.与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3.在广泛的pH范围(pH5-8)有活性。
4. 应用范围广,可以用于RT-PCR、cDNA 合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。
储存条件:低温运输,-20℃及保存,有效期一年。
使用方法:一般在有RNA的反应体系中加1-10U即可。
疑难解答:
Q:本产品抑制 RNase的Ki值是多少?
A:本产品是混合物,不能确定其Ki值。
Q:百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA,都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase,它们的主要区别何在?
A:一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC);后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容,故 RNA可以直接使用;后者会抑制很多后续反应,需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定,更耐热。
CTP溶液(2.5mM)促销关键词:BTN131219,2.5mM,CTP溶液(2.5mM),CTP Solution,2.5mM
ARB14058 蓖麻凝集素(RCA)含量分析 Ricinus communis agglutinin,rca ELISA KIT
ARB11199 人组织相容性复合体I类相关基因A(MICA)含量检测 Human mica ELISA KIT
ARB13129 小鼠胚胎干细胞系MESPU30(M30)Elisa定量检测 Mouse embryonic stem mespu30,m30 ELISA KIT
987-65-5 三磷酸腺苷二* ATPNa2
BTN100818 MDS 42rec A trf A菌种 MDS 42rec A trf A Strain
BTN130920 dITP溶液,100mM dITP Solution,100mM
F030236 HRP标记山羊抗猪IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Pig IgG
百里酚蓝* Maltase 62625-21-2
SJ0826 印度墨水
ARB10771 人抗SS-B/LA抗体酶标法分析 Human ss-b/la antibody,ELISA KIT
F050307 小鼠IgG1抗体 Mouse IgG1
BOC-L-亮*酸 Amberlite 719 13139-15-6
CYB164003 羊抗人C3-HRP
普鲁士蓝 Azodicarbonamide 14038-43-8
SJ0685 100bp plus
CTP溶液(2.5mM)促销关键词:BTN131219,2.5mM,CTP溶液(2.5mM),CTP Solution,2.5mM
·长效期SDS-PAGE配胶液
编号:BTN100909
英文名称:Stable SDS-PAGE Gel Buffer
规格:200mL
本产品专门用于配制长效SDS-PAGE胶,本配胶液pH值偏酸性,使PAGE胶比常规SDS-PAGE更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·动物RNA提取试剂(TRIzol)
编号:BTN3070
英文名称:Animal RNA Extraction Reagent TRIzol
规格:100mL
本试剂盒是类似于TRIzol、基于异硫*酸胍/酚/*仿提取原理的快速总RNA提取试剂,可用于从各种动物组织(包括白细胞)和部分植物材料中快速提取总RNA。
产品特点:
1. 操作简单快速,只要10分钟左右,可以全在室温下进行。
2. RNA 质量高,OD260/OD280一般在1.9左右。一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
3.适用于大部分实验材料,如培养细胞、各种动物材料和少数植物材料。植物RNA的提取最好使用植物RNA提取试剂盒。
4. 性价比高于进口TRIzol和TRI Reagent等同类产品。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:下面的操作步骤是用1mL 本产品进行的微量提取的,细胞使用量一定要准确,不能超过下述用量,否则将超出本产品的裂解能力,RNA产量将急剧降低。如果样品量大,请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境最好用高效无毒的固相RNase清除剂(BTN3080)彻底处理。
1. 对贴壁细胞(10 平方厘米):吸尽培养液,加入1mL的本产品用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移至干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
2. 对悬浮细胞(五百万至一千万个):离心收集细胞,吸尽液体,加入1mL本产品,用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
3. 对新鲜组织(50-100mg):将新鲜组织剪切成小块,放入10mL或15mL塑料离心管中,加入1mL的本产品,用Polytron 剪切式匀浆器冰上匀浆30秒左右,将匀浆液转移至新的1.5mL塑料离心管中,进入第6步。注意:对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),使用量不要超过30-50mg,否则十分容易产生DNA污染。对10mg以下的组织,最好加入本公司的微量RNA 助沉剂。
4. 对RNAhold 保存的组织(50-100mg):先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同第3 步。RNAhold处理后的组织韧性很强,匀浆时间需要适当延长。
5. 对液氮中保存的组织(50-100mg):在研钵中研磨成粉,加入1mL 本产品,用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中,进入第6 步。
6.在装有裂解物/匀浆物的1.5mL塑料离心管中加入0.2mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒。注意:一定要把官底的溶液震荡起来,否则只是液面的振动。
7. 13000-15000g室温离心3分钟。
8. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下50-100μl上清液不取。
9. 对脂类丰富的组织(如脂肪组织和脑组织),需再重复*仿抽提一到两次以让*仿充分去除脂类分子。
10.在上清液中加入等体积的异丙醇,振荡器上振荡30秒混匀。
11. 13000-15000g室温离心5分钟,离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果组织使用量低于10mg或需要提高RNA 回收率,可以将离心时间延长到20或30分钟。
12.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
13.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡混匀30秒。
14. 13000-15000g室温离心1分钟。
15.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 重复第13-15的洗涤步骤一次(也可以省略)。
17. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃RNA
沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的后续使用。
18.室温放1-2分钟后立即加入50-100μl RNase-free 水使RNA沉淀溶解。
千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
注意:由于RNase-free 水没有主动灭活残留RNase的功能,而任何方法提取的RNA 都可能有残留的RNase,所以强烈建议客户使用本公司推出的具有主动灭活残留RNase 功能的、同时跟后续RT-PCR等反应兼容的液相RNase 清除剂(BTN3091)。
附一:RNA 完整性的电泳检测(仅供参考,本产品不含相关试剂)
如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。如果是简单检测,可以使用TAE缓冲液或超快核酸电泳液进行常规电泳,但文献报道必须使用RNAload这样的变性上样液(BioTechniques,9:558,1990)。普通DNA上样液不含变性剂,也没经过去RNase处理,所以最好不要使用,否则RNA容易降解。
动物RNA电泳后应该在UV下呈现三条清晰的rRNA 带,28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA 条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA 带不清晰或比例小于此范围则表示RNA 有降解(因为大的RNA 被酶降解的可能更大)。
跟动物一样,植物果实和种子的RNA一般有三条电泳带,但植物叶片的RNA 有四条或更多rRNA带,多余的RNA 来源于叶绿体。
如果电泳发现RNA样品中有DNA污染(一般是使用过多样品造成),可分别用非酶DNA 清除剂或RNase-free DNase 清除。
附二:RNA产量和纯度测定(仅供参考,本产品不含相关试剂)
用pH在7.5-8.2的TE缓冲液将5-10μL RNA稀释10-20倍后在OD260和OD260测光吸收,通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。RNA的产率还随组织的营养状态和组织的种类不同而不同,一般来说,代谢旺盛的组织(如肝脏和肾脏)RNA的产率高,代谢不旺盛的组织(如肌肉和脂肪组织)RNA的产率低,下面是常见动物组织的RNA产率:
肌肉,胎盘和脑组织: 1-2μg RNA/mg 组织
肝,胰和肾组织: 5-10μg RNA/mg 组织
培养细胞: 5-15μg/10E6细胞
RNA的纯度通过OD260/OD280 来确定,一般在1.8-2.1之间即算合格。但即使低于此范围,一般也不会影响RT-PCR等反应。
蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除,多糖污染可以用多糖清除剂去除。
我公司正在火爆促销核酸扩增(PCR)系列产品,欢迎您的垂询选购CTP溶液(2.5mM)促销。
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文献和实验,add) Aprotinin Pepstatin Benzamidine Leupeptin PMSF 5mM Vanadate 5mM DTT
Lysis Buffers提取蛋白的细胞裂解溶液【UCSF】
mM EGTA5 mM NaF150 mM NaCl1 mM NaPPi1% NP40(add)2 mM DTT1 mM Vanadate.5% Aprotinin100 uM PMSF(or for IP,add)AprotininPepstatinBenzamidineLeupeptinPMSF5mM Vanadate5mM DTT
CTP [Na4 ] 571.1 280 13.0x103 GTP [Na4 ] 611.1 252 13.7x103 UTP [Na4 ] 572.1 262 10.2x103 Concentration: c[M]=Amax /E; Amax = maximum of absorption. EDTA C10 H14 O8 N2 Na2 x2H2 O; Mw=372.3g/M
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