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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货2×Taq PCR MasterMix (不含染料)特价优惠,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:北京现货2×Taq PCR MasterMix (不含染料)特价优惠
规格:1ml|5*1ml
品牌:百奥莱博
编号:QN0973
产地:国产|进口
本公司生产的PCR MasterMix中加入了高性能PCR增强剂和稳定剂,适用于常规的PCR反应和一些结构复杂的模板如GC含量高、 有二级结构等的PCR扩增。由于多种PCR增强剂和稳定剂的发现, 稳定高效预配好的PCR混合液不仅简化了操作程序、减少了污染、 大大降低劳动强度和取样误差,而且增加了PCR反应的特异性,降低了对PCR条件的要求,最低可扩增2个拷贝的目的模板, 使实验结果更加精确。 该产品分为含染料和不含染料两种体系, 含染料的PCRMasterMix在PCR结束后可以直接电泳, 无需再加入上样缓冲液。
别名:2×Taq PCR MasterMix (不含染料)
英文名称:2×Taq PCR MasterMix (不含染料)
储存条件:-20
性状:液体
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北京现货2×Taq PCR MasterMix (不含染料)特价优惠关键词:2×Taq PCR MasterMix ,不含染料,2×Taq PCR MasterMix (不含染料)
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·杀稻瘟菌素S
编号:QN0028
英文名称:Blasticidin S
规格:10mg|100mg
Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷类抗生素,通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。
CAS:3513-03-9
分子式:C17H27CIN8O5
分子量:458.9
纯度:>95%(HPLC)
储存条件:-20℃
别名:灭稻瘟素
抗性基因:
目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种,一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls,另外两种是脱*酶基因,包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD基因是最常用的筛选标志,用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验,也可用于E.Coli。
应用浓度:
1)Escherichia coli
E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳动物细胞
哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。
- 25-100 µg/ml in bacteria
- 1-30 µg/ml in mammalian cells
操作步骤(哺乳动物稳转株筛选)
Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中,在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。
(1)转染后48h,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%);
(2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基;
(3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。
(4)转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
PCR基础 聚合酶链式反应(PCR)过程利用模板变性,引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程,因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般,经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到。反应包括几个成分(表1)。模板可以为纯化的基因组或质粒DNA;由RNA转化得到的cDNA;或未经纯化的粗制生物样品,如细菌克隆或噬菌斑。引物确定了扩增产物的序列和长度。最常用的热稳定聚合酶是Taq DNA
【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
替代 SYBR Green 1 ,毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备 Fast-Plus EvaGreenqPCR试剂盒一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线( HRM )分析的 PCR 试剂盒。技术特点Fast-Plus EvaGreen® qPCR Master Mix 是一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的 PCR 试剂。该试剂体系囊括了PCR领域的两项突破性技术:EvaGreen® PCR 染料和 Cheetah Taq
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