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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称:
Real-time PCR检测
- 规格:
样本
Real-time PCR检测
标本要求:组织、细胞、血液
实验周期:60个循环内,一周出结果
样品要求:
1、组织: 100mg(黄豆大小),最少50mg(绿豆大小),脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加。
2、细胞:1×106个细胞,贴壁细胞舒展,未变圆;
3、血液:2mL,最少1mL新鲜血液DTA抗凝,最好是尽快用红细胞裂解液分离,充分去除红细胞,保留有核细胞,然后加入trizol放入-80度保存
收费价格:普通指标:第一个基因120元/样本,第二个基因60元/样本;micRNA检测:200元/样本/基因
产品介绍:荧光定量PCR是通过荧光染料(SYBR Green)或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
实验流程:
样本接收:组织、细胞、血液、其它
实验步骤:
引物设计
组织匀浆-RNA提取-RNA浓度测定—逆转录—荧光定量PCR-数据分析
实验结果:完整项目报告(扩增曲线、数据分析、引物信息、实验报告)
注意事项:
1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg,低温运输;
2、培养细胞:收集细胞沉淀后,液氮速冻,低温保存或运输(-80℃,避免反复冻融);
3、血液标本:以抗凝管保存血样(-4℃保存3~5天,如果要长时间保存需放在-80℃);
4、RNA样品:纯度OD260/280 比值为1.8-2.0,浓度≥500ng/ul,体积≥20ul。
5、样本运输:可选择以下任何一种方式寄送标本
a.组织样本、细胞样本以干冰运输;
b.细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出);
分子生物学检测---免疫印迹检测/生化检测
IP实验服务
COIP实验服务
ELISA检测实验服务
生化检测实验服务
免疫印迹WB(普通蛋白)实验服务
免疫印迹WB(磷酸化蛋白)实验服务
免疫印迹WB(核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白)实验服务
血常规(动物外周血)检测实验服务
化学发光实验服务
组织样本匀浆实验服务
引物合成实验服务
Real-time PCR检测实验服务
RT-PCR(电泳)实验服务
DNA/质粒实验服务
甲基化检测MSP实验服务
甲基化检测BSP实验服务
micRNA检测实验服务
质粒构建实验服务
质粒扩增实验服务
质粒提取实验服务
药效评价实验服务
本公司还提供以下实验方面服务
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
“免疫学”、“动物实验”、“蛋白质相关”、
实验要求、样本情况、收费标准、操作流程等详情请咨询我司客服!
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文献和实验【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍?
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记,本打算用流式检测转染效率,但发现荧光信号很弱,转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化,相对定量分析,发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍,这虽然表明转染mimic成功,但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是?也没查到相关文献,谁能给我一些参考?非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高,我的也是这样,有的能够上调1000倍
A. Real-Time PCR Chemistry Real-time systems for PCR were improved by probe-based, rather than intercalator-based, PCR product detection. The principal drawback to intercalator-based detection of PCR product accumulation
Why is Real-Time PCR Important
Beta actin SYBR. Two groups of 36 replicates each. SDS Methods Fluorescent Chemistry Choices TaqMan Uses the 5’-Nuclease Assay and FRET
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